Аннотация
Питательная среда – основа для роста микроорганизмов и выделения гемокультур при диагностике инфекции кровотока (ИК). Основа питательных сред в РФ – панкреатический гидролизат рыбной муки. В Европейских странах используются сердечно-мозговые среды (СМС) для выделения микроорганизмов из крови. В РФ производство СМС отсутствует. Цель исследования: апробировать рецептуру и способ приготовления СМС (жидкой и агара) для повышения эффективности выделения гемокультур. Определены физико-химические и биологические показатели качества разработанной СМС. Микробиологический контроль СМС осуществлён исследованием крови терапевтических больных кардиологического профиля. На основе разработанной технологии приготовления сердечного и мозгового экстрактов (СМЭ) сконструированы жидкая и агаровая среды (СМС, СМА). Жидкая СМС разливалась по флаконам, насыщалась инертным газом. Флакон, закрытый резиновой пробкой, завальцованный металлическим колпачком, представлял закрытую систему. Для определения качества 260 проб крови исследованы на СМС и на тиогликолевой среде (ТГС). На СМС рост аэробов в 2,4 раза, микроаэрофилов – в 3,2 раза выше, чем на ТГС. Рост анаэробов на ТГС отсутствовал (p<0,001). Моновидовые гемокультуры получены на СМС в 13,4 раза чаще, чем на сахарном бульоне, 2,3 раза чаще, чем на ТГС (p<0,001). Смешанные гемокультуры чаще получены на СМС, чем на ТГС (7,3 и 1,7%, соответственно). Качество плотного СМА протестировано на крови 300 больных на 5% кровяном мясо-пептонном агаре (МПА) и СМА при аэробном и анаэробном культивировании. На плотном СМА рост аэробов в 2 раза, микроаэрофилов – в 3,6 раза выше, чем на 5% МПА. В анаэробных условиях на плотном СМА рост аэробов в 2 раза, микроаэрофилов в 2,5 раза выше, чем на 5% МПА (p<0,001). Анаэробы на МПА не росли. Сердечно-мозговые среды (жидкая и агар) создают оптимальные условия для роста широкого спектра возбудителей ИК.
Список литературы
1. Lagier J., Armougom F., Million M., Hugon P., Pagnier I., Robert C. et al. Microbial culturomics: Paradigm shift in the human gut microbiome study. Clinical Microbiology and Infection.2012; 18(12):
1185-93.
2. Dunne W.M., Burnham C.D. The dark art of blood cultures. Washington: ASM Press DC; 2018.
3. Микробиология и иммунология: учебник. Воробьёв А.А., ред. 2-е изд. М.: ОАО «Издательство «Медицина»; 2005.
4. Pien B.C., Sundaram P., Raoof N., Costa S.F., Mirrett S., Woods C.W., et al. The clinical and prognostic importance of positive blood cultures in adults. Amer. J. of Medicine. 2010; 123(9): 819-28.
5. Каргальцева Н. М., Кочеровец В. И., Миронов А. Ю., Борисова О. Ю. Метод получения гемокультуры при диагностике инфекции кровотока. Клиническая лабораторная диагностика. 2020; 65(3): 185-90.
6. Белобородов В.Б. Роль современных рекомендаций по профилактике инфекций, связанных с катетеризацией сосудов. Инфекции и антимикробная терапия. 2002; 6: 177-80.
7. Wilson M.L., Mitchell M., Morris A.J., Murray P.R., Reimer L.G., Reller L.B. et al. Principles and procedures for blood cultures; approved guideline. CLSI document M47-A. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2007.
8. Шепелин И. А., Миронов А. Ю., Шепелин К. А. Питательные среды (справочник бактериолога). М.: Издательство «ЗАО А-Принт»; 2015.
9. Шепелин А.П., Дятлов И.А., Марчихина И.И., Миронова Е.Н. Разработка технологии приготовления панкреатического гидролизата рыбной муки – белковой основы бактериологических питательных сред. Клиническая лабораторная диагностика. 2011; 9: 48-9.
10. Ковтун Ю.С., Курилова А.А., Таран Т.В., Катунина Л.С., Чурикова Н.В. Сравнительная оценка потенциальных основ микробиологических сред. Проблемы особо опасных инфекций. 2014; 3:
92-5.
11. Поляк М.С., Сухаревич В.И., Сухаревич М.Э. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии. СПб.: Издательство «ЭЛБИ-СПб»; 2008.
12. Weinstein M.P., Mirrett S., Reimer L.G Wilson M.L., Smith-Elekes S., Chuard C.R., Yoho K.L., Reller L.B. Controlled evaluation of BacT/Alert standard aerobic and FAN aerobic blood culture bottles for detection of bacteremia and fungemia. J. Clin. Microb. 1995; 33(4): 978-81.
13. Cockerill F.R., Reed G.S., Hughes J.G., Torgerson C.A., Vetter E.A., Harmsen W.S. et al. Clinical comparison of BACTEC 9240 Plus Aerobic/F resin bottles and the isolator aerobic culture system for detection of bloodstream infections. J.Clin.Microbiol. 1997; 35(6): 1469-72.
14. Torres I., Gimenez E., Pascual T., Bueno F., Huntley D., Martinez M. et al. Short-term incubation of positive blood cultures in brain-heart infusion broth accelerates identification of bacteria by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass-spectrometry. J. Med. Microbiol. 2017; 66(12): 1752-8.
15. Пашков Е. П., Миронов А. Ю., Култаев М. С., Плотица Ю. М. Питательная среда для культивирования неспорообразующих анаэробных бактерий на основе мясо-пептонного бульона. Лабораторное дело. 1988; 6: 47-9.
16. Миронов А. Ю., Ташлиев А. Р. Питательные среды из отечественных ингредиентов для анаэробной бактериологии. Здравоохранение Туркменистана. 1989; 9: 42-6.
17. Воробьёв А. А., Пашков Е. П., Миронов А. Ю., Быков А. С., Шимчук Л. Ф. Современное состояние лабораторной диагностики инфекций, вызываемых неспорообразующими анаэробами, и пути её совершенствования. Вестник РАМН. 1994;8: 26-9.
18. Кочеровец В. И., Михайлова В. С., Миронов А. Ю., Петраков А. А., Понамарёва Т. Р. Методы микробиологического анализа неспорообразующих анаэробных бактерий. М.: ТОО «Лабинформ»; 1996.
19. Peretz A., Pastukh N., Isakovich N., Koifman A., Brodsky D., Mizrahi H. et al. Efficacy of an enrichment media for increasing threshold for carbapenem-resistant Enterobacteriaceae Screening. J. Clin.
Laboratory Analysis. 2016; 30(5): 563-6.
20. Подкопаев Я.В., Морозова Т.П., Домотенко Л.В., Акимова Н.А., Храмов М.В. Питательная среда для культивирования и выделения возбудителей гнойных бактериальных менингитов, сухая (варианты). Патент РФ № 2471865; 2013.
21. Меньшиков В.В., Козлов Р.С., Поляк М.С., Михайлова В.С., Иноземцева Л.О., Шуляк Б.Ф. и др. Внутрилабораторный контроль качества питательных сред для клинических микробиологических исследований: Клинические рекомендации. М.: Федерация лабораторной медицины; 2014.
22. Суханова С.М., Захарова Н.Е., Конду Э.И., Голубенко И.А. МУК 4.2.2316-08. Методы контроля бактериологических питательных сред: Методические указания. М: ФБУЗ ФЦГиЭ Роспотребнадзора; 2008.
23. Каргальцева Н.М., Кочеровец В.И., Борисова О.Ю., Пастушенков В.Л., Афанасьев С.С. Сердечно-мозговая питательная среда для диагностики инфекции в кровотоке и способ её получения.
Патент РФ № 2650863; 2018.
24. Каргальцева Н.М., Борисова О.Ю., Кочеровец В.И., Алёшкин В.А., Афанасьев С.С., Пастушенков В.Л. и др. Способ получения питательной среды для выделения гемокультуры при диагностике инфекции кровотока. Патент РФ № 2660708; 2018.
25. Дятлов И. А., Шепелин А. П., Алёшкин В. А. Состояние и тенденции развития клинической и санитарной микробиологии в Российской Федерации и проблема импортозамещения. Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60(8): 61-5.
26. Шепелин А. П., Домотенко Л. В., Дятлов И. А., Миронов А. Ю., Алёшкин В. А. Современные подходы к проблеме импортозамещения в области производства питательных сред. Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60(6): 63-5.