СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СРЕДЫ ГИССА С КРАХМАЛОМ И ИНДИКАТОРА АНДРЕДЕ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ НА ДИФТЕРИЙНУЮ ИНФЕКЦИЮ

Аннотация

Дифтерия продолжает оставаться актуальным заболеванием даже в странах с многолетней массовой вакцинопрофилак-
тикой. Наибольшее опасение вызывает ситуация в Африканском регионе, где с начала 2023 года продолжается рост случаев
заболеваний и смерти от дифтерии. В Российской Федерации случаев заболевания дифтерией и бактерионосительства
в 2023 году не зарегистрировано. Сохраняется риск завозных случаев дифтерии на территорию нашей страны. С целью
сохранения благополучной ситуации по дифтерии необходимо поддерживать качественный уровень бактериологической
диагностики с проведением всех регламентированных нормативными документами тестов, включая определение токсиген-
ности и биовара возбудителя.
Цель: модификация рецепта приготовления индикатора Андреде и дифференциально-диагностической среды Гисса с крах-
малом для определения биовара Corynebacterium diphtheriae.
Материал и методы. Использованы контрольные токсигенные штаммы C. diphtheriае биовара gravis № 665, токсигенный
штамм C. diphtheriaе биовара mitis № 6765, токсигенные штаммы C. ulcerans №№ 675 и 7819, C. pseudodiphtheriticum
«Соколов», штамм Staphylococcus aureus 25923, дикие токсигенные штаммы C. diphtheriае и C. ulcerans. Культивирование
штаммов проводили согласно МУ 4.2.3065-13 и 4.2.3852-23 «Лабораторная диагностика дифтерийной инфекции».
Результаты и обсуждение. Проведены исследования по разработке модернизированного рецепта приготовления индика-
тора Андреде для определения ферментации крахмала при идентификации биовара возбудителя дифтерийной инфекции.
Представлены результаты сравнительных исследований с индикатором Андреде, приготовленным по ранее предложенному
рецепту и модернизированному варианту с использованием химического реактива – крахмал четырёх отечественных произ-
водителей. Определены сроки хранения готовой среды Гисса с индикатором Андреде в лаборатории.
Заключение. Модернизированный рецепт индикатора Андреде и приготовления среды Гисса с крахмалом позволит повы-
сить эффективность и исключить ошибки при идентификации биовара у C. diphtheriae.

Annotation

Diphtheria continues to be relevant diseases even in countries with many years of mass vaccine prevention. The greatest concern is the
situation in the African region, where the increase in cases and deaths from diphtheria has continued since the beginning of 2023. In
the Russian Federation, no cases of diphtheria and bacterial carriers were registered in 2023. In this regard, the risk of imported cases
of diphtheria to the territory of our country remains. Therefore, in order to maintain a favorable situation for diphtheria, it is necessary
to maintain a qualitative level of bacteriological diagnostics with all tests by regulatory documents, including the determination of
toxigenicity and biovar of the pathogen.
Purpose. Modification of the recipe for the preparation of the Andrede indicator and Gissа medium with starch to determine the biovar
C. diphtheriae.
Material and methods. Control toxigenic strains of C. diphtheriae biovar gravis № 665, toxigenic strain of C. diphtheriae biovar mitis
№ 6765, toxigenic strains of C. ulcerans № 675 and 7819, C. pseudodiphtheriticum Sokolov, strain Staphylococcus aureus were used
25923, as well as wild toxigenic strains of C. diphtheriae and C. ulcerans. The strains were cultured in accordance with MU 4.2.3065-
13 and 4.2.3852-23 «Laboratory Diagnostics of Diphtheria Infection».
Results and discussion. Studies were carried out to develop a modernized recipe for preparing the Andrede indicator for determining
starch fermentation in the identification of biovar of the causative agent of diphtheria infection. The results of comparative studies
with the Andrede indicator prepared according to the previously proposed recipe and an upgraded version using a chemical reagent —
starch from four manufacturers are presented. The shelf life of the finished Gissа medium with the Andrede indicator in the laboratory
was determined.
Conclusion. The modernized recipe for the Andrede indicator and the preparation of Gissа medium with starch will increase the efficiency
and eliminate errors in the identification of biovar in C. diphtheriae.
Key words: Corynebacterium diphtheriaе; bacteriological diagnostics; saccharolytic activity; starch; Gissа medium; Andrede indicator

Об авторах

Список литературы

Л И Т Е РАТ У РА
1. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия на-
селения в Российской Федерации в 2023 году: Государственный
доклад. М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека; 2024.
2. Лебедева М.Н. Руководство к практическим занятиям по микро-
биологии. М.: Медгиз; 1950.
3. Справочник по микробиологическим и вирусологическим мето-
дам исследования. М.О. Биргер ред. М.: Медицина; 1967.
4. Инструкция по бактериологическому исследованию на дифтерию
от 02.09.1967 г. № 690-67. Минздрав СССР; 1967.
5. Инструкция по бактериологическому исследованию на дифтерию
(Приложение 4 к Приказу Минздрава СССР № 580 от 26.06.1974
г.). М.: Минздрав СССР; 1974.
6. Инструкция по бактериологической и серологической индикации
возбудителя дифтерии и его токсина (Приложение 5 к Приказу
Минздрава СССР № 450 от 02.04.1986 г.). М.: Минздрав СССР;
1986.
7. Методические указания «Лабораторная диагностика дифтерийной
инфекции» от 09.01.1998 г. МУК 4.2.698-98. Минздрав России. М.:
«Интерсэн»;1998. ISBN 5-89834-02-3.
8. Методические указания «Лабораторная диагностика дифтерийной
инфекции» от 14.07.2013 г. МУК 4.2.3065-13. Роспотребнадзор;
2013. ISBN 978-5-7508-1195-3.
9. Борисова О.Ю., Гадуа Н.Т., Пименова А.С., Афанасьев С.С., Афа-
насьев М.С., Миронов А.Ю. и др. Состояние и проблемы бакте-
риологической диагностики дифтерийной инфекции в Россий-
ской Федерации. Клиническая лабораторная диагностика. 2020;
65(11):717-23. DOI: 10.18821/0869-2084-2020-65-11-717-723.
10. Борисова О.Ю., Гадуа Н.Т., Пименова А.С., Шепелин А.П., Домо-
тенко Л.В., Миронов А.Ю. и др. Внешний контроль качества про-
ведения бактериологического исследования при выделении Corynebacterium
diphtheriae. Клиническая лабораторная диагностика.
2021; 66(8): 509-12. DOI: 10.51620/0869-2084-2021-66-8-509-512.
11. О результатах проведения внешнего контроля качества
исследований по бактериологической диагностике дифтерии и
коклюша и серологической диагностике дифтерии в Российской
Федерации в 2020 году. Информационное письмо № 02/23440-
2020-27 от 16.11.2020 г. Федеральная служба по надзору в
сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
(Роспотребнадзор).
12. О результатах проведения внешнего контроля качества
исследований по бактериологической диагностике дифтерии и
коклюша и серологической диагностике дифтерии в Российской
Федерации в 2021 году. Информационное письмо № 02/20615-
2021-27 от 12.10.2021 г. Федеральная служба по надзору в
сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
(Роспотребнадзор).
13. О результатах проведения внешнего контроля качества
исследований по бактериологической диагностике дифтерии и
коклюша и серологической диагностике дифтерии в Российской
Федерации в 2022 году. Информационное письмо № 02/20896-
2022-27 ДСП от 21.10.2022 г. Федеральная служба по надзору
в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
(Роспотребнадзор).
14. О результатах проведения внешнего контроля качества
исследований по бактериологической диагностике дифтерии и
коклюша и серологической диагностике дифтерии в Российской
Федерации в 2023 году. Информационное письмо № 02/17141-
2030-27 от 09.10.2023 г. Федеральная служба по надзору в
сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
(Роспотребнадзор).
15. Борисова О.Ю., Пименова А.С., Гадуа Н.Т., Чагина И.А., Дон-
ских Е.Е., Кафарская Л.И. Ошибки, допущенные лабораториями
при выполнении внешнего контроля качества по лабораторной
диагностике дифтерии. Проблемы медицинской микологии. 2023;
25(2): 92.
16. Харсеева Г.Г., Тюкавкина С.Ю., Миронов А.Ю. Дифтерия: харак-
теристика возбудителя и лабораторная диагностика (лекция). Кли-
ническая лабораторная диагностика. 2020; 65(11): 699-706. DOI:
10.18821/0869-2084-2020-65-11-699-706.
REFERENCES
1. On the state of sanitary and epidemiological well-being of the
population in the Russian Federation in 2023: State report. Moscow:
Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and
Human Welfare; 2024. (in Russian)
2. Lebedeva M.N. Microbiology Practice Guide [Rukovodstvo k prakticheskim
zanyatiyam]. Moscow: Medgiz; 1950. (in Russian)
3. Handbook of Microbiological and Virological Research Methods
[Spravochnik po mikrobiologicheskim I virusologicheskim metodam
issledovaniya]. M.O. Birger, ed. Moscow: Meditsina; 1967. (in Russian)
4. Instructions for Bacteriological Examination for Diphtheria № 690-67
dated 02.09.1967. Moscow: Ministerstvo zdravookhraneniya SSSR;
1967. (in Russian)
5. Instructions for bacteriological examination for diphtheria (Appendix
4 to Order of the USSR Ministry of Health № 580 of 26.06.1974).
Moscow: Ministerstvo zdravookhraneniya SSSR; 1974. (in Russian)
6. Instructions for bacteriological and serological indication of the diphtheria
pathogen and its toxin (Appendix 5 to Order of the USSR Ministry
of Health № 450 of 02.04.1986). Moscow: Ministerstvo zdravookhraneniya
SSSR; 1986. (in Russian)
7. Methodological Guidelines «Laboratory Diagnostics of Diphtheria Infection
» dated 09.01.1998, MUK 4.2.698-98. Minzdrav RF. Moscow:
Intersen; 1998. ISBN 5-89834-02-3. (in Russian)
8. Methodological Guidelines «Laboratory Diagnostics of Diphtheria Infection
» dated 14.07.2013, MUK 4.2.3065-13. Rospotrebnadzor; 2013.
ISBN 978-5-7508-1195-3. (in Russian)
9. Borisova O.Yu., Gadua N.T., Pimenova A.S., Afanasyev S.S.,
Afanasyev M.S., Mironov A.Yu. et al. Condition and problems
of bacteriological diagnosis of diphtheria infection in the Russian
Federation. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2020; 65(11):
717-23. DOI: 10.18821/0869-2084-2020-65-11-717-723. (in Russian)
10. Borisova O.Yu., Gadua N.T., Pimenova A.S., Shepelin A.P.,
Domotenko L.V., Mironov A.Yu. et al. External quality control of
bacteriological study during isolation of Corynebacterium diphtheriae.
Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2021; 66(8): 509-12.
DOI: 10.51620/0869-2084-2021-66-8-509-512. (in Russian)
11. On the results of external quality control of studies on bacteriological
diagnostics of diphtheria and pertussis and serological diagnostics of
diphtheria in the Russian Federation in 2020. Information letter №
02/23440-2020-27 dated 16.11.2020. Federal Service for Supervision
of Consumer Rights Protection and Human Welfare (Rospotrebnadzor).
(in Russian)
12. On the results of external quality control of studies on bacteriological
diagnostics of diphtheria and pertussis and serological diagnostics of
diphtheria in the Russian Federation in 2021. Information letter №
02/20615-2021-27 dated 12.10.2021. Federal Service for Supervision
of Consumer Rights Protection and Human Welfare (Rospotrebnadzor).
(in Russian)
13. On the results of external quality control of studies on bacteriological
diagnostics of diphtheria and pertussis and serological diagnostics
of diphtheria in the Russian Federation in 2022. Information letter
№ 02/20896-2022-27 Chipboard dated 21.10.2022. Federal Service
for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare
(Rospotrebnadzor). (in Russian)
14. On the results of external quality control of studies on bacteriological
diagnostics of diphtheria and pertussis and serological diagnostics of
diphtheria in the Russian Federation in 2023. Information letter №
02/17141-2030-27 dated 09.10.2023. Federal Service for Supervision
of Consumer Rights Protection and Human Welfare (Rospotrebnadzor).
(in Russian)
15. Borisova O.Yu., Pimenova A.S., Gadua N.T., Chagina I.A., Donskikh
E.E., Kafarskaya L.I. Errors made by laboratories when performing
external quality control on laboratory diagnostics of diphtheria.
Problemy meditsinskoy mikologii. 2023; 25(2): 92. (in Russian)
16. Kharseeva G.G., Tyukavkina S.Yu., Mironov A.Yu. Diphtheria: characteristics
of the causative agent and laboratory diagnostics (lecture).
Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2020; 65(11): 699-706.
DOI: 10.18821/0869-2084-2020-65-11-699-706. (in Russian)

Ключевые слова