Аннотация
В обзоре описаны основные характеристики клеток естественных киллеров (NK-клетки) человека, их фенотип и методы определения функциональной активности с помощью проточной цитометрии. NK-клетки играют важную роль во врожденном и адаптивном иммунитете против инфекций и опухолей, и первоначально были охарактеризованы на основе способности лизировать злокачественные и инфицированные клетки без предварительной сенсибилизации или иммунизации. NK-клетки человека имеют фенотип CD3
CD56
CD16
и могут быть разделены на две субпопуляции в зависимости от уровня экспрессии CD56. CD56
NK-клетки преимущественно участвуют в иммунорегуляции, продуцируя цитокины. CD56
NK-клетки в основном обладают цитолитической активностью. NK-клетки опосредуют уничтожение инфицированных и опухолевых клеток через несколько эффекторных механизмов: по средству перфорин/ гранзимсодержащих гранул, рецепторов апоптоза и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности. Цитотоксичность NK-клеток и продукция цитокинов обеспечивают регуляторную роль NK-клеток, как важных участников адаптивной иммунной системы. NK-клетки снабжены различными рецепторами, которые стимулируют или ингибируют их активность. Активация NK-клеток зависит от баланса между ингибирующими и активирующими рецепторами. «Золотым стандартом» определения функциональной активности NK-клеток человека является тест по высвобождению радиоактивного хрома из клеток-мишеней. Этот метод нелегко выполнить в клинической практике из-за трудностей в утилизации радиоактивных отходов, короткого времени полураспада изотопов, дороговизне и сложностей в стандартизации. В статье описываются цитофлуориметрические методы для клинического определения активности NK-клеток. Эти методы позволяют избежать ряда проблем, связанных с использованием радиоактивности, а также они быстрые и подлежат стандартизации.
Об авторах
Абакушина Елена ВячеславовнаФГБУ «ФМИЦ им. П.А. Герцена» Минздрава России 249036, г. Обнинск, Калужская область МРНЦ им. А.Ф. Цыба abakushina@mail.ru
Список литературы
Trincheri G. Biology of natural killer cells. Adv. Immunol. 1989; 47: 187-376.
Абакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. Основные свойства и функции NK-клеток человека. Иммунология. 2012; 33 (4): 210-6.
Whiteside T.L., Herberman R.B. Role of human natural killer cells in health and disease. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1994; 1 (2): 125-33.
Walzer T., Dalod M., Robbins S.H., Zitvogel L., Vivier E. Naturalkiller cells and dendritic cells: “l’union fait la force”. Blood. 2005; 106 (7): 2252-8.
Vivier E., Nunes J.A., Vely F. Natural killer cell signaling pathways. Science. 2004; 306: 1517-9.
Vivier E., Tomasello E., Paul P. Lymphocyte activation via NKG2D: towards a new paradigm in immune recognition? Curr. Opin. Immunol. 2002; 14: 306-11.
Henkard P.A. Mechanism of lymphocyte-mediated cytotoxity. Ann. Rev. Immunol. 1985; 3: 31-58.
Podack E.R. The molecular mechanism of lymphocyte-mediated tumor cell lysis. Immunol. Today. 1985; 6: 21-7.
Kane K.L., Ashton F.A., Schmitz J.L., Folds J.D. Determination of natural killer cell functions by flow cytometry. Clin. Diagnost. Lab. Imm. 1996; 3 (3): 295-300.
Хайдуков С.В. Многоцветный анализ в проточной цитометрии для медико-биологических исследований: Дис. … докт. биол. наук. С-Пб., 2008.
Ogbomo H., Hahn A., Geiler J., Michaelis M., Doerr H.W., Cinatl Jr.J. NK sensitivity of neuroblastoma cells determined by a highly sensitive coupled luminescent method. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006; 339 (1): 375-9.
Penack O., Gentilini C., Fischer L., Asemissen A.M., Scheibenbogen C., Thiel E. et al. CD 56dimCD 16neg cells are responsible for natural cytotoxicity against tumor targets. Leukemia. 2005; 19 (5): 835-40.
Zimmermann S.Y., Esser R., Rohrbach E., Klingebiel T., Koehl U. A novel four-colour flowcytometric assay to determine natural killer cell or T-cell-mediated cellular cytotoxicity against leukaemia cells in peripheral or bonemarrowspecimens containing greater than 20% of normal cells. J. Immunol. Methods. 2005; 296 (1-2): 63-76.
Chang, L., Gusewitch G.A., Chritton D.B.W., Folz J.C., Lebeck L.K., Nehlsen-Cannarella S.L. Rapid flow cytometric assay for the assessment of natural killer cell activity. J. Immunol. Methods. 1993; 166: 45-54.