ЦИТОПАТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ВОЗБУДИТЕЛЯ ДИФТЕРИИ В СОСТАВЕ БИОПЛЕНКИ
ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)
Аннотация
При колонизации носоглотки токсигенными штаммами возбудителя дифтерии происходит выделение токсина, способствующего гибели эпителиальных клеток. У бактерионосителей развития клинической картины заболевания не происходит. Это связано с особенностями состояния их иммунной системы, особенностями продукции дифтерийного экзотоксина коринебактериями в составе биоплёнки. Цель — определение характера цитопатического действия C. diphtheriae в составе биоплёнки на культуре клеток СНО-К1. Исследованы планктонные и биоплёночные (120- и 720-час.) культуры штаммов: C. diphtheriae gravis tox+ № 665, C. diphtheriae gravis tox+ № 6765, C. diphtheriae mitis tox+ № 269, C. diphtheriae gravis tox+, выделенный от больного с диагнозом «дифтерия ротоглотки локализованная» C. diphtheriae gravis с «молчащим» tox-геном. Биоплёночные (120- и 720-ч) культуры штаммов возбудителя дифтерии получали по методике Watnik. ЦПД штаммов коринебактерий исследовали на культуре клеток СНО-К1 с учётом в инвертированном микроскопе. При исследовании ЦПД планктонных культур токсигенных штаммов коринебактерий установлено, что количество живых клеток СНО-К1 уже через 24 ч было незначительным (25,3±1,2%) и резко уменьшилось (2,5±0,5%) через 72 ч культивирования. Под воздействием биоплёночных и, особенно, 720-ч культур обнаружена иная динамика ЦПД: количество живых клеток через 24 ч оставалось значительным (82,5±2,2%), при 72-часовом снижалось до 25,0±3,0%. При исследовании фильтратов планктонных и биоплёночных культур штамма C. diphtheriae с «молчащим» tox-геном выявлены аналогичные закономерности. Количество живых клеток СНО-К1 при воздействии фильтрата 720-час. биоплёночной культуры было значительно выше (р≤0,05), чем при исследовании токсигенных штаммов коринебактерий. Рассматривая характер ЦПД обнаружили, что для планктонных культур токсигенных штаммов коринебактерий свойственно изменение монослоя клеток, проявляющееся их истончением и удлинением. При исследовании 720-часовых биоплёночных культур при 72-ч экспозиции обнаружено появление большого количества округлённых клеток (63-69%). Для ЦПД, формирующегося под воздействием фильтратов планктонных и биоплёночных культур C. diphtheriae с «молчащим» tox-геном, штаммов недифтерийных коринебактерий, характерно округление клеток и формирование симпластов. В составе биоплёнки интенсивность ЦПД токсигенных штаммов C. diphtheriae и штамма C. diphtheriae с «молчащим» tox-геном снижалась. ЦПД, проявляющееся истончением и удлинением клеток СНО-К1, связано с действием дифтерийного экзотоксина, округление — ферментов коринебактерий и, по всей видимости, фрагментов поверхностных структур — адгезинов. Пониженное выделение токсина и ферментов за пределы матрикса биоплёнки C. diphtheriae является важной причиной «бессимптомности» носительства при дифтерии.