Аннотация
Получены поликлональные моноспецифические сыворотки к белкам токсина и антигенам S-слоя Bacillus anthracis, выделенным в препаративном электрофорезе. При применении метода флуоресцирующих антител (МФА) иммуноглобулины сывороток к белку S-слоя B. anthracis м.м. 94 кДа обладали специфичностью и специфической активностью на представленном количестве штаммов, а в пробах почвы обнаруживали споры в концентрации Р*10 КОЕ/мл, что позволяет рекомендовать данные иммуноглобулины для индикации B. anthracis. Белки м.м. 90 кДа, относящиеся к антигенам токсина B. anthracis, в иммуноблоттинге реагировали с сыворотками больных кожной формой сибирской язвы и морских свинок, иммунизированных и выживших после заражения. Сыворотки к ним видоспецифичны, могут быть использованы для диагностики заболевания (обнаружение протективного антигена) и определения продукции белков в реакции иммунодиффузии с растущими культурами (РИДРК).
Об авторах
Баркова Ирина АнатольевнаФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора 400131, г. Волгоград канд. мед. наук, доц., зав. лаб. оперативной диагностики бактериальных и вирусных инфекций barina_10@mail.ru
Список литературы
Lamonica J.M., Wagner M.A., Echenbrenner M., Williams L.E., Miller T.L., Patra G. et al. Comparative secretome analyses of the Bacillus anthracis strains with variant plasmid contents. Infect. Jmmun. 2005; 73 (6): 3646-58.
Chitlaru Т., Gat O., Gozlan Y., Ariel N., Shafferman A. Differential proteomic analysis of the Bacillus anthracis secretome: distinct and chromosome CO2 — dependent cross talk mechanisms modulate extracellular proteolytic activites. J. Bacteriol. 2006; 188 (10): 3551-71.
Chitlaru T., Gat O., Grosfeld H., Inbar I., Gozlan Y., Shafferman A. Identification of In Vivo-Expressed Immunogenic Proteins by Serological Proteome Analysis of the Bacillus anthracis Secretome. Infect. Immun. 2007; 75: 2841-52.
Walz A., Mujer C., Connolly J., Alefantis T., Khan A.S., DelVecchio V.G. et al. Bacillus anthracis secretome time course under hostsimulated conditions and identification of immunogenic proteins. Proteome Sci. 2007; 5: 11.
Гончарова А.Ю., Микшис Н.И., Кудрявцева О.М., Болотникова М.Ф., Новикова Л.В., Красичков Г.Г. и др. Получение поликлональных антител к белкам S-слоя Bacillus anthracis и изучение их специфичности в иммуноферментном анализе. Проблемы особо опасных инфекций. 2010; (3): 46-9.
Свешников П.Г., Киселев В.И., Северин Е.С., Пальцев М.А. Биобезопасность: применение моноклональных антител для индикации опасных патогенов и диагностики инфекционных болезней. Молекулярная медицина. 2004; (4): 67-72.
Love T.E., Redmond C., Mayers C.N. Real time detection of anthrax spores using highly specific anti-EA 1 recombinant antibodies produced by competitive panning. J. Immunol. Methods. 2008; 334 (1-2): 1-10.
Wang D., Yang R., Zhang Z.P., Bi L.J., You X.Y., Wei H.P. et al. Detection of B. anthracis spores and vegetative cells with the same monoclonal antibodies. PLoS One. 2009; 4 (11): e7810.
Makam S., Kingston J., Ramakrishna U., Radhika M., Tuteja U., Murali R. et al. Аpplication of extractable antigen 1 (ЕА1) for specific detection of Bacillus anthracis cells. IJPRBS. 2013; 4 (2): 274-83.
Walper S.A., Anderson G.P., Brozozog P.A., Glaven R.H., Liu J.L., Bernstein R.D. et al. Rugged single domain antibody detection elements for Bacillus anthracis spores and vegetative cells. PLoS One. 2012; 7 (3): e32 801.