ДИАГНОСТИКА ДРОЖЖЕЙ MALASSEZIA МЕТОДОМ MALDI-TOF МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ И ИХ РАСПРОСТРАНЁННОСТЬ СРЕДИ ЖИТЕЛЕЙ МОСКВЫ

Аннотация

Дрожжи рода Malassezia являются представителями нормальной микобиоты кожи человека и теплокровных животных,
однако при себорейном и атопическом дерматите, фолликулите и др. они выступают в роли оппортунистических патогенов.
Клиническая лабораторная диагностика видов Malassezia включает усовершенствованный набор физиолого-биохимических
тестов, молекулярно-генетические методы, MALDI-TOF масс-спектрометрию. В базу данных масс-спектрометров, используемых в практике клинической лабораторной диагностики, включены только два вида: Malassezia furfur и M. pachydermatis.
Цель: повысить качество MALDI-TOF идентификации грибов Malassezia на основе расширения базы данных масс-спектров
для совершенствования клинической лабораторной диагностики видового разнообразия дрожжевых грибов в России.
Материал и методы. В работе использованы 7 культур грибов рода Malassezia из коллекции ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова, а также 54 изолята Malassezia, изолированные с кожных покровов лиц разного пола в возрасте от
14 лет до 71 года без дерматологических заболеваний. Идентификация проведена с помощью расширенного списка физиолого-биохимических тестов, MALDI-TOF масс-спектрометрии, молекулярно-генетических методов.
Результаты. 7 тест-культур Malassezia идентифицированы физиолого-биохимическими методами как M. sympodialis.
Масс-спектры этих тест-культур идентичны между собой, но значительно отличаются от таковых M. furfur по величинам m/z мажорных сигналов, что позволило пополнить имеющуюся базу данных масс-спектрометра ещё одним видом этих
дрожжей. Клинические штаммы от 54 человек идентифицированы методом MALDI-TOF масс-спектрометрии: 44 человека
(81%) явились носителями M. sympodialis, 1 человек (2%) — M. furfur, 1 человек (2%) — Malassezia неопредёленного вида, от 8
человек (15%) эти дрожжи не удалось выделить и идентифицировать. Штамм Malassezia, не соответствующий обновлённой базе данных масс-спектрометра, исследован молекулярно-генетическими методами; установлена его принадлежность
к виду M. globosa, масс-спектр которого также пополнил базу данных прибора. Установлено, что пик обсеменённости кожных покровов дрожжами Malassezia соответствует возрасту 19÷29 лет, причём у женщин этот показатель с возрастом
снижается, а у мужчин сохраняется на постоянном уровне.
Заключение. Расширение базы данных масс-спектрометра позволило усовершенствовать клиническую лабораторную диагностику дрожжей рода Malassezia и провести исследование видового разнообразия этих микромицетов среди жителей г.
Москвы.

Annotation

Yeast of the genus Malassezia are residents of the normal mycobiota of human and warm-blooded animals skin, however, in seborrheic
and atopic dermatitis, folliculitis, etc. they act as opportunists. The modern clinical diagnostics of Malassezia species includes an
improved number of physiological and biochemical tests, molecular methods and MALDI-TOF mass spectrometry. The database of
mass spectrometers used in clinical laboratory practice includes only two species — M. furfur and M. pachydermatis.
Aim: expansion of the MALDI-TOF mass spectrometer database for clinical laboratory diagnostics of the Malassezia yeast species
diversity in Moscow.
Material and methods. Experiments were carried out on 7 strains of Malassezia genus fungi from the collection of the I. I. Mechnikov
Institute, as well as 54 Malassezia strains isolated from the skin of different sexes persons aged from 14 years to 71 years without
dermatological diseases. Identification was carried out using an extended list of physiological and biochemical tests, MALDI-TOF
mass spectrometry and molecular methods.
Results. 7 Malassezia test cultures were identified by physiological and biochemical methods as M. sympodialis. The mass spectra of
these test cultures were identical to each other, but significantly differed from those of M. furfur in terms of m/z major signals, which
made it possible to supplement the existing spectrometer database with one more species of these yeasts. Further, strains from 54
people were studied by MALDI-TOF mass spectrometry: 44 people (81%) were carriers of M. sympodialis, 1 person (2%) — M. furfur,
1 person (2%) — an undetermined species of Malassezia, and from 8 people (15%) these yeasts could not be isolated. The Malassezia
strain, which did not correspond to the updated database of the mass spectrometer, was examined by molecular methods and found
to belong to the species M. globosa, whose mass spectrum also supplemented the database of the device. It was found that the peak
of Malassezia yeast contamination corresponds to the age of 19-29 years, and in women this parameter decreases with age, while in
men it remains at the same level.
Conclusion. The expansion of the mass spectrometer database made it possible to improve the clinical laboratory diagnosis of yeast
Malassezia and to conduct a study of these micromycetes species diversity among residents of Moscow.
Key words: skin; Malassezia; M. sympodialis; M. furfur; M. globosa; MALDI-TOF mass spectrometry

Об авторах

Список литературы

ЛИТЕРАТУРА (ПП. 2-5, 8-13 СМ. REFER —
ENCES )
1. Арзуманян В.Г., Колыганова Т.И. Новое в таксономии, идентификации и свойствах дрожжей рода Malassezia Baillon. Микология
сегодня. А.В. Кураков, А.Ю. Сергеев, ред. М.: Национальная академия микологии. 2022; 4:132-60.
6. Арзуманян В.Г. Грибы Malassezia на коже здоровых людей и больных атопическим дерматитом. Вестник РАМН. 2001; 2: 29-31.
7. Арзуманян В.Г. Дрожжевая микрофлора кожи и респираторного
тракта человека при аллергических заболеваниях. Дисс. … д-ра
биол. наук. М.; 2002.
14. Родченко Ю. В. Грибы Malassezia furfur у новорождённых отделений хирургии, реанимации и интенсивной терапии: оптимизация
микробиологической диагностики. Дисс…. канд. мед. наук. М.:
2021.
REFERENCES
1. Arzumanyan V.G., Kolyganova T.I. New in taxonomy, identification
and properties of yeasts of the genus Malassezia Baillon. In: Mycology
Today. A.V. Kurakov, A.Yu. Sergeev, eds. Moscow: National`naya
akademiya mikologii; 2022; 4:132-60. (in Russian)
2. Tragiannidis A., Groll A., Velegraki A., Boekhout T. Malassezia
Fungemia, Antifungal susceptibility testing and epidemiology of
Nosocomial Infections. In: T. Boekhout, E. Gueho, P. Mayser, A.
Velegraki, eds. Malassezia and the Skin. Springer Verlag Berlin Heidelberg: 2010; 229-51.
3. Siguta T., Takashima M., Kodama M., Tsuboi К., Nishikawa A. Description of a new yeast species, Malassezia japonica, and its detection in patients with atopic dermatitis and healthy subjects. J. Clin.
Microbiol. 2003; 41(10): 4695-9.
4. Siguta T., Tajima M., Takashima M., Amaya M. et al. A new yeast,
Malassezia yamatoensis, isolated from patient with seborreic dermatitis, and its distribution in patients and healthy subjects. Microbiol.
Immunol. 2004; 48(8): 579-83.
5. Honnavar P., Prasad G.S., Ghosh A., Dogra S., Handa S., Rudramurthy S.M. Malassezia arunalokei spp. nov., a novel yeast species isolated from seborrheic dermatitis patients and healthy individuals from
India. J. Clin. Microbiol. 2016; 54: 1826-34.
6. Arzumanyan V.G. Malassezia fungi on the skin of healthy people and
patients with atopic dermatitis. Vestnik Rossiyskoy akademii meditsinskikh nauk. 2001; 2: 29-31. (in Russian)
7. Arzumanyan V.G. Yeast microflora of the skin and respiratory tract of
a person in allergic diseases. Diss. Moscow; 2002. (in Russian)
8. Kaneko T., Makimura K., Abe M., Shiota R., Nakamura Y. et al. Revised culture-based system for identification of Malassezia species. J.
Clin. Microbiol. 2007; 45(11): 3737-42.
9. Wu G., Zhao H., Li C., Rajapakse M. P., Wong, W.C., Xu J. et al. Genus-wide comparative genomics of Malassezia delineates its phylogeny, physiology, and niche adaptation on human skin. Front. Genet.
2015; 11:e1005614.
10. Diongue K., Kébé O., Faye M.D., Samb D., Diallo M.A., Ndiaye M.
et al. MALDI-TOF MS identification of Malassezia species isolated
from patients with pityriasis versicolor at the seafarers’ medical service in Dakar, Senegal. J. Mycol. Med. 2018; 28(4):590-3.
11. Honnavar P., Ghosh A.K., Paul S., Shankarnarayan S.A., Singh P.,
Dogra S. et al. Identification of Malassezia species by MALDI-TOF
MS after expansion of database. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2018;
92(2):118-23.
12. Romald P.N., Kindo A.J., Mahalakshmi V., Umadevi U. Epidemiological pattern of Malassezia, its phenotypic identification and antifungal
susceptibility profile to azoles by broth microdilution method. Indian
J. Med. Microbiol. 2020;38(3-4):351-6.
13. Luebberding S, Krueger N, Kerscher M. Skin physiology in men and
women: in vivo evaluation of 300 people including TEWL, SC hydration, sebum content and skin surface pH. Int. J. Cosmet. Sci. 2013;
35(5):477-83.
14. Rodchenko Yu.V. Malassezia furfur fungi in newborns in surgical,
intensive care and intensive care units: optimization of microbiological diagnostics. Diss. Мoscow; 2021. (in Russian)

Ключевые слова