Иммуноцитохимическая оценка стимуляции лимфоцитов фитогемагглютинином реакции бласттрансформации лимфоцитов с моноклональными антителами Ki-67

Аннотация

Предложен новый (иммуноцитохимический) способ оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) человека при их стимуляции фитогемагглютинином (ФГА) вместо общепринятого радиометрического метода с использованием в качестве метки
Н-тимидина. Реакцию оценивали с помощью люминесцентного микроскопа при непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве маркера пролиферирующих клеток ядерного антигена Ki-67, выявляемого с помощью моноклональных антител (МКА) Ki-67. О функциональной способности лимфоцитов судили по количеству визуализированных (светящихся) Ki-67-положительных клеток, появляющихся после 3-суточной ФГА-стимуляции их пролиферации. Проведено сравнение иммуноцитохимического (с маркером Ki-67) и радиометрического (с меткой
Н-тимидином) методов ФГА-стимуляции лимфоцитов. Обосновано преимущество иммуноцитохимического метода оценки РБТЛ перед радиометрическим относительно возможности его более широкого внедрения в лабораторную практику.

Об авторах

Список литературы

Nowell P. Phytohemagglutinin: an initiator of mitosis in cultures of normal human leukocytes. Cancer Res. 1960; 20: 462-6.

Вершигора А.Е. Основы иммунологии. Киев: Вища школа; 1975.

Report of the Commetee on Clinical Immynology of the IUIS. Eur. J. Immunol. 1976; 6: 231-4.

Фримель Г., ред. Иммунологические методы. М.: Медицина; 1987: 294-302.

Клаус Дж., ред. Лимфоциты. Методы. М.: Мир; 1990: 292-6.

Йогер Л., ред. Клиническая иммунология и аллергология. т. 1. М.: Медицина; 1987.

Новиков Д.К., Новикова В.И. Оценка иммунного статуса. М.: Медицина; 1995: 23.

Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина; 1987.

Beresford M.J., Wilson G.D., Makris A. Measuring proliferation in breast cancer: practicalities and applications. Breast Cancer Res. 2006; 8(6): 216.

Chien C.H., Lai J.N., Liao C.F., Wang O.Y., Lu L.M., Huang M.I. et al. Mifepristone acts as progesterone antagonist of non-genomic responses but inhibits phytohemagglutinin-induced proliferation in human T cells. Hum. Reprod 2009; 24(8): 1968-75.

Dabrowski M.P., Stankiewicz W., Plusa T., Chcialowski A., Szmigielski S. Competition of IL-1 and IL-1ra determines lymphocyte response to delayed stimulation with PHA. Mediators Inflamm. 2001; 10(3): 101-7.

Булычева Т.И., Дейнеко Н.Л., Вольпина О.М., Владимирова Н.М. Иммуноцитохимическая визуализация мономерных и олигомерных форм ядрышкового белка В23/нуклеофозмина в лимфоцитах человека в процессе пролиферации. Иммунология. 2011; 5: 231-6.

Малышева М.В., Дейнеко Н.Л., Булычева Т.И., Зацепина О.В., Капланская И.Б., Магоулас Х. Сравнительный анализ экспрессии ключевых белков ядрышка в лимфоцитах периферической крови здоровых доноров, активированных к пролиферации in vitro. Иммунология. 2010; 1 (31): 13-7.

Ключевые слова