ИНТЕРФЕРОНОВЫЙ «АВТОГРАФ» У ПАЦИЕНТОВ С СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ – ВЗАИМОСВЯЗЬ С ЛАБОРАТОРНЫМИ И КЛИНИЧЕСКИМИ ПОКАЗАТЕЛЯМИ (пилотное исследование)

Аннотация

Актуальность. В патогенезе системной красной волчанки (СКВ) важное значение играют нарушения в работе как врожденного, так и адаптивного типов иммунного ответа. Нарушения врожденного типа иммунного ответа проявляются в избыточной продукции интерферонов (ИФН) I типа плазмоцитоидными дендритными клетками (пДК).
Цель: изучить экспрессию интерферонстимулированных генов (ИСГ) у пациентов с СКВ и уточнить ее взаимосвязь с клиническими и лабораторными показателями.
Материал и методы. В исследование были включены 139 пациентов (123 женщины (88%) и 16 мужчин (12%)), с достоверным диагнозом СКВ. Длительность заболевания составила 3,0 [0,3;12,0] года, SLEDAI-2K 7 [4;11] баллов, SDI 0 [0;1] баллов. Для оценки ИФН «автографа» были отобраны 3 гена (MX1, RSAD2, EPSTI1). Общую РНК выделяли из цельной крови, используя коммерческий набор «РИБО-золь-А» (ИнтерЛабСервис, Москва). Обратно транскриптазную (ОТ) реакцию проводили с помощью коммерческого набора «Реверта» (ИнтерЛабСервис, Москва). Для полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени применяли прибор модели Quant Studio 5 (Applied Biosystems) и наборы для экспрессии генов (Applied Biosystems, USA); β-актин использовали в качестве эндогенного контроля.
Результаты. Экспрессия ИСГ у пациентов с СКВ была достоверно выше, по сравнению со здоровыми донорами: MX 1- 8,77 (2,6-15,57); RSAD- 24,2 (5,29-46,9); EPST I -14,4 (5,76-29,29); у доноров – 1,25 (0,79-1,65); 1,01 (0,69-1,73); 1,08 (0,74-2,11), соответственно, p<0,05. ИФН «автограф» присутствовал у 55 (72,4%) пациентов и отсутствовал у 21 (27,6%). Отмечалась позитивная корреляционная взаимосвязь уровня экспрессии ИСГ с титром АНФ, уровнем АТ к дсДНК, Sm и отрицательная взаимосвязь с компонентами комплемента, р<0,05. Взаимосвязи между экспрессией ИСГ и активностью заболевания по SLEDAI -2K получено не было. Пациенты с эритемой на лице, нерубцовой аллопецией, лейкопенией имели более высокий уровень экспрессии ИФН стимулированных генов, поражение нервной системы, напротив ассоциировалось с более низкой экспрессией генов интерферона, р<0,05.
Заключение. Гиперэкспрессия ИСГ отмечается приблизительно у 70% пациентов; ассоциируется с более высокой иммунологической активностью, поражением кожи, развитием гематологических нарушений. Подробное изучение данного фенотипа может позволить всесторонне охарактеризовать его особенности и персонифицировать терапию.

Annotation

In the pathogenesis of systemic lupus erythematosus (SLE), disturbances in both the innate and adaptive immune response types play an important role. Disturbances in the innate immune response type are manifested in excessive production of type I interferons (IFN) by plasmacytoid dendritic cells (pDCs).
Objective. To study the expression of interferon-stimulated genes (ISG) in patients with systemic lupus erythematosus (SLE); to clarify the relationship between the expression of interferon-stimulated genes and clinical and laboratory parameters.
Material and methods. The analysis included 139 patients (123 women (88%) and 16 men (12%)) with a reliable diagnosis of SLE. The duration of the disease was 3.0 [0.3; 12.0] years, SLEDAI-2K 7 [4; 11] points, SDI 0 [0; 1] points. To assess the IFN «signature», 3 genes (MX1, RSAD2, EPSTI1) were selected. Total RNA was isolated from whole blood using the commercial RIBO-zol-A kit (InterLabService, Moscow). Reverse transcriptase (RT) reaction was performed using the commercial Reverta kit (InterLabService, Moscow). Real-time polymerase chain reaction was performed using a Quant Studio 5 (Applied Biosystems) and gene expression kits (Applied Biosystems, USA); β-actin was used as an endogenous control.
Results. Expression of IFN-stimulated genes in SLE patients was significantly higher than in healthy donors: MX 1 — 8.77 (2.6-15.57); RSAD — 24.2 (5.29-46.9); EPST I -14.4 (5.76-29.29); in donors — 1.25 (0.79-1.65); 1.01 (0.69-1.73); 1.08 (0.74-2.11), respectively, p < 0.05. IFN «autograph» was present in 55 (72.4%) patients and absent in 21 (27.6%) patients. There was a positive correlation between the level of IFN-stimulated genes expression and the level of ANA, the level of antibodies to dsDNA, Sm and a negative relationship with complement components, p<0.05. No relationship was obtained between the expression of IFN-stimulated genes and disease activity according to SLEDAI-2K. Patients with facial erythema, non-scarring alopecia, leukopenia had a higher level of expression of IFN-stimulated genes, damage to the nervous system, on the contrary, was associated with lower interferon activity, p < 0.05.
Conclusion. Disturbances in the production of type I IFN are important in the pathogenesis of SLE and are observed in approximately 70% of patients. Hyperexpression of IFN-stimulated genes is associated with higher immunological activity, skin damage, and the development of hematological disorders. A detailed study of the IFN immunophenotype may allow a comprehensive characterization of its features and personalization of therapy.
Key words: systemic lupus erythematosus; type I interferons; gene expression; autoantibodies; disease activity

Об авторах

Список литературы

ЛИТЕРАТУРА (пп. 2-10, 12-20 см. REFERENCES)
1. Насонов Е.Л., Соловьев С.К., Аршинов А.В. Системная красная волчанка: история и современность. Научно-практическая ревматология. 2022; 60(4):397-412. DOI: 10.47360/1995-4484-2022-397-412.
11. Насонов Е.Л., Авдеева А.С. Иммуновоспалительные ревматические заболевания, связанные с интерфероном типа I: новые данные. Научно-практическая ревматология. 2019; 57(4):452-61. DOI.10.14412/1995-4484-2019-452-461.
13. Насонов Е.Л., ред. Российские клинические рекомендации. Ревматология. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2020.

REFERENCES
Nasonov E.L., Soloviev S.K., Arshinov A.V. Systemic lupus erythematosus: history and modernity. Nauchno-Prakticheskaya Revmatologiya. 2022; 60(4):397-412. DOI: 10.47360/1995-4484-2022-397-412. (in Russian)
Tanaka Y. State-of-the-art treatment of systemic lupus erythematosus. Int. J. Rheum. Dis. 2020; 23: 465–71. DOI: 10.1111/1756-185X.13817.
Van Vollenhoven R.F., Mosca M., Bertsias G., Isenberg D., Kuhn A., Lerstrøm K. et al. Treat-to-target in systemic lupus erythematosus: Recommendations from an international task force. Ann. Rheum. Dis. 2014; 73: 958. DOI: 10.1136/annrheumdis-2013-205139.
Morand E.F., Furie R., Tanaka Y., Bruce I.N., Askanase A.D., Richez C. et al. Trial of anifrolumab in active systemic lupus erythematosus. N. Engl. J. Med. 2020; 382: 211–21. DOI: 10.1056/NEJMoa1912196.
Tanaka Y., Tummala R. Anifrolumab, a monoclonal antibody to the type I interferon receptor subunit 1, for the treatment of systemic lupus erythematosus: An overview from clinical trials. Mod. Rheumatol. 2021; 31: 1–12. DOI: 10.1080/14397595.2020.1812201.
Murphy G., Isenberg D.A. New therapies for systemic lupus erythematosus — past imperfect, future tense. Nat. Rev. Rheumatol. 2019; 15: 403-12. DOI: 10.1038/s41584-019-0235-5.
Tsokos G.C. Systemic lupus erythematosus. N. Engl. J. Med. 2011; 365: 2110–21. DOI: 10.1056/NEJMra1100359.
Longhi M.P., Trumpfheller C., Idoyaga J., Caskey M., Matos I., Kluger C. et al. Dendritic cells require a systemic type I interferon response to mature and induce CD4+ Th1 immunity with poly IC as adjuvant. J. Exp. Med. 2009; 206:1589-1602. DOI: 10.1084/jem.20090247.
Le Bon A., Thompson C., Kamphuis E., Durand V., Rossmann C., Kalinke U. et al. Cutting edge: enhancement of antibody responses through direct stimulation of B and T cells by type I IFN. J. Immunol. 2006; 176:2074-8. DOI: 10.4049/jimmunol.176.4.2074.
Baechler E.C., Batliwalla F.M., Karypis G., Gaffney P.M., Ortmann W.A., Espe K.J. et al. Interferon-inducible gene expression signature in peripheral blood cells of patients with severe lupus. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003; 100:2610-5. DOI: 10.1073/pnas.0337679100.
Nasonov E.L., Avdeeva A.S. Immunoinflammatory rheumatic diseases associated with type I interferon: new evidence. Nauchno-prakticheskaya revmatologiya. 2019; 57(4):452-61. DOI: 10.14412/1995-4484-2019-452-461. (in Russian)
Petri M., Orbai A.M., Alarcón G.S., Gordon C., Merrill J.T., Fortin P.R. et al. Derivation and validation of the systemic lupus international collaborating clinics classification criteria for systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum. 2012; 64(8):2677-86. DOI: 10.1002/art.34473.
Nasonov E.L., ed. Russian clinical guidelines. Rheumatology [Rossiyskie klinicheskie rekomendatsii. Revmatologiya]. Moscow: GEOTAR-Media; 2020. (in Russian)
Gladman D.D., Ginzler E., Goldsmith C., Fortin P., Liang M., Urowitz M. et al. The development and initial validation of the systemic lupus International Collaborating Clinics/American College of Rheumatology (SLICC/ACR) damage index for systemic lupus erythematosus. Arthr. Rheum. 1996; 39(3):363-9. DOI: 10.1002/art.1780390303.
Toro-Domínguez D., Martorell-Marugán J., Goldman D., Petri M., Carmona-Sáez P., Alarcón-Riquelme M.E. et al. Longitudinal Stratification of Gene Expression Reveals Three SLE Groups of Disease Activity Progression. Arthr. Rheum. 2018; 70(12): 2025-35. DOI: 10.1002/art.40653.
Banchereau R., Hong S., Cantarel B., Baldwin N., Baisch J., Edens M. et al. Personalized immunomonitoring uncovers molecular net-works that stratify lupus patients. Cell. 2016; 165:551-65. DOI: 10.1016/j.cell.2016.03.008.
Guthridge J.M., Wagner C.A., James J.A. The promise of precision medicine in rheumatology. Nat. Med. 2022; 28(7):1363-71. DOI: 10.1038/s41591-022-01880-6.
Bengtsson A.A., Rönnblom L. Role of interferons in SLE. Best Pract. Res. Clin. Rheumatol. 2017; 31(3):415-28. DOI: 10.1016/j.berh.2017.10.0.
Eloranta M.L., Rönnblom L. Cause and consequences of the activated type I interferon system in SLE. J. Mol. Med. (Berl). 2016; 94(10):1103-10. DOI: 10.1007/s00109-016-1421-4.
Weckerle C.E., Franek B.S., Kelly J.A., Kumabe M., Mikolaitis R.A., Green S.L. et al. Network analysis of associations between erum interferon-α activity, autoantibodies, and clinical features in systemic lupus rythematosus. Arthritis Rheum. 2011;63(4):1044-53. DOI: 10.1002/art.30187.

Ключевые слова