Научно-практический журнал Клиническая лабораторная диагностика

ИССЛЕДОВАНИЕ МРНК ГЕНОВ WT1, BAALC, EVI1, PRAME И HMGA2 В ОБРАЗЦАХ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ ПРИ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗАХ

Ольховский Игорь Алексеевич

Doi: https://doi.org/10.51620/0869-2084-2022-67-10-613-620 ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Купить
Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Известно, что повышенная экспрессия генов WT1, BAALC, EVI1, PRAME и HMGA2 вовлечена в патогенез онкогематологических заболеваний. Высказано предположение, что одновременное количественное определение комплекса мРНК в циркулирующих в крови клетках может отражать специфику патологических пролиферативных процессов, а соотношение экспрессии отдельных мРНК может стать полезным диагностическим маркером. Транскриптомный профиль клеток острого лейкоза как правило оценивается с использованием дорогостоящих технологий NGS и микрочипирования после предварительной процедуры выделения мононуклеаров. Однако до сих пор не публиковались результаты использования мультиплексной реакции ПЦР одновременного определения всех указанных выше мРНК в образцов цельной крови. Цель: определение уровня мРНК генов WT1, BAALC, EVI1, PRAME и HMGA2 в пробах венозной крови методом мультиплексной ОТ-ПЦР. В работу включено 127 образцов крови пациентов, обследованных при первичном обращении с последующим подтвержденным диагнозом острого лейкоза. В качестве групп сравнения были выбраны 87 проб пациентов не имеющих онкогематологического диагноза, в том числе 31 образец (К1) с нормальной формулой клеток крови и 56 образцов (К2) с нарушением клеточного состава — анемией, лейкоцитозом и тромбоцитопенией. Выделение РНК из проб цельной крови, и обратную транскрипцию выполняли с использованием наборов «Рибо-золь-D» и «Реверта-L» (ФБУН ЦНИИЭ, Россия). Определение уровня экспрессии мРНК генов WT1, BAALC, EVI1, PRAME и HMGA2 методом мультиплексной ПЦР-РВ выполняли с использованием разработанного in house метода мультиплексной ПЦР. Уровень мРНК исследуемых генов, характеризовался высокой межиндивидуальной вариацией и не коррелировал с количеством циркулирующих лейкоцитов или бластных клеток крови. Экспрессия мРНК WT1 определялась в цельной крови только у одного пациента из группы сравнения и в 112 (88%) пробах пациентов с лейкозом и сочеталась со снижением уровня экспрессии мРНК HMGA2 и высокими значениями мРНК BAALC. В отличии от групп сравнения у пациентов с лейкемией наблюдались более высокие уровни мРНК BAALC при ОМЛ и ОЛЛ, повышенные значения мРНК PRAME при ОМЛ и ОПЛ, но более низкие уровни HMGA2 при ОПЛ. Впервые в мультиплексном формате ПЦР одновременно определены уровни пяти мРНК WT1, BAALC, EVI1, PRAME и HMGA2 в образцах цельной крови у пациентов с острыми лейкозами. С учетом наиболее выраженного преобладания вклада одной из мРНК в их суммарном уровне экспрессии, предложено выделять отдельные типы преимущественной экспрессии (BEPH-критерий), отличающиеся в разных нозологических вариантах лейкемии. Полученные данные поддерживают гипотезу патогенетической роли дисбаланса РНК и формировании различных транскриптомных субпопуляций лейкемических клеток.

Для цитирования:

Ольховский И.А., Горбенко А.С., Столяр М.А., Бахтина В.И., Михалёв М.А., Ольховик. Т.И., Судариков А.Б., Сидорова Ю.С., Поспелова Т.И., Колесникова М.А., Капорская Т.С., Лыскова В.А. Исследование мРНК генов WT1, BAALC, EVI1, PRAME и HMGA2 в образцах цельной крови. Клиническая лабораторная диагностика. 2022; 67(10): 613-620. https://doi.org/10.51620/0869-2084-2022-67-10-613-620

For citation:

Olkhovskiy I.A., Gorbenko A.S., Stolyar M.A., Bakhtina V.I., Mikhalev M.A., Olkhovik T.I., Sudarikov A.B., Sidorova Yu.S., Pospelova T.I., Kolesnikova M.A., Kaporskaya T.S., Lyskova V.A. Study of mRNA of WT1, BAALC, EVI1, PRAME and HMGA2 genes in whole blood samples. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics). 2022; 67(10): 613-620 (in Russ.). https://doi.org/10.51620/0869-2084-2022-67-10-613-620