Аннотация
Пренатальная диагностика врожденных и наследственных заболеваний является относительно молодой и стремительно развивающейся областью медицины. Использование современного арсенала лабораторных, инструментальных и клинических методов оценки состояния здоровья плода позволяет выявить пороки и аномалии развития уже на ранних сроках беременности, обнаружить или с высокой долей вероятности исключить наследственный характер патологии. Идеальный метод пренатальной диагностики должен быть неинвазивным и комплексным, позволяющим одновременно
диагностировать анеуплоидии, структурные хромосомные аномалии и генные мутации. Этим требованиям вполне отвечает неинвазивное пренатальное тестирование (НИПТ). Внедрение и использование технологий НИПТ привело к существенному снижению количества инвазивных процедур и потребовало разработки новых алгоритмов обследования беременных с учетом результатов и возможностей этого метода диагностики генетической патологии. НИПТ в целях обнаружения генетической патологии развивающегося плода является актуальным направлением пренатальной медицины. НИПТ на основе анализа коротких фрагментов внеклеточной ДНК, выделенной из плазмы беременной женщины, все более широко внедряется и используется в клинической практике в разных странах мира. Основным источником циркулирующей в материнской крови ДНК плода являются клетки трофобласта, подвергающиеся апоптозу. Альтернативным источником получения генетической информации рассматриваются интактные клетки плода, которые могут быть выделены из периферической крови и цервикального канала беременных женщин Возможность их неинвазивного по отношению к плоду получения и дальнейшего анализа открывают перспективу исследования полного генома единичных клеток в целях пренатальной диагностики хромосомных аномалий и моногенной патологии. В настоящей работе представлен опыт выявления клеток экстраворсинчатого трофобласта в цервикальных образцах беременных женщин с помощью флуоресцентно меченых антител к поверхностному антигену HLA-G и проведена оценка эффективности такой детекции при сравнительном анализе частоты HLA-G позитивных клеток и клеток плода, выявленных в тех же цервикальных образцах с помощью FISH-анализа с соответствующими ДНК-зондами.
Список литературы
1. Liehr T. False-positives and false-negatives in on-invasive prenatal testing (NIPT): what can we learn from a meta-analyses on>750,000 tests? Molecular. Cytogenetics. 2022; 15(1):36.
2. Salomon L.J., Sotiriadis A., Wulff C.B., Odibo A., Akolekar R. Risk of miscarriage following amniocentesis or chorionic villus sampling: systematic review of literature and updated metaanalysis. Ultrasound Obstet. Gynecol. 2019; 54(4):442-51.
3. Ashoor G., Syngelaki A., Poon L.C., Rezende J.C., Nicolaides K.H. Fetal fraction in maternal plasma cell-free DNA at 11-13 weeks’ gestation: relation to maternal and fetal characteristics. Ultrasound Obstet. Gynecol. 2013; 41(1):26-32.
4. Palomaki G.E., Kloza E.M., Lambert-Messerlian G.M. DNA sequencing of maternal plasma to detect Down syndrome: an international clinical validation study. Genet. Med. 2011;
13(11):913-20.
5. Norton M.E., Brar H., Weiss J., Karimi A., Laurent L.C., Caughey A.B. et al. Non-invasive Chromosomal Evaluation (NICE) Study: results of a multicenter prospective cohort study for detection of fetal trisomy 21 and trisomy 18. Am. J. Obstet. Gynecol. 2012; 207(2):137.e1-8.
6. Hui L. Noninvasive prenatal testing for aneuploidy using cellfree DNA — New implications for maternal health. Obstet. Med. 2016;9(4):148-52.
7. Vossaert L., Chakchouk I., Zemet R., Van den Veyver I.B. Overview and recent developments in cell-based noninvasive prenatal testing. Prenat. Diagn. 2021; 41(10):1202–14.
8. Herzenberg L.A., Bianchi D.W., Schröder J., Cann H.M., Iverson G.M. Fetal cells in the blood of pregnant women: Detection and enrichment by fluorescence-activated cell sorting. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979; 76(3):1453-5.
9. Gänshirt-Ahlert D.M., Burschyk M., Garritsen H.S., Helmer L., Miny P., Horst J. et al. Magnetic cell sorting and the transferrin receptor as potential means of prenatal diagnosis from maternal blood. Am. J. Obstet. Gynecol. 1992; 166(5):1350-5.
10. Zolotukhina T.V., Shilova N.V. Fetal cells in maternal blood: recovering by fluorescence-activated cell sorting. Early prenatal diagnosis, fetal cells and DNA in the mother, present state and perspectives. In: Macek M. Sr., Bianchi D., Cuckle H. eds. Prague: Charles University in Prague: The Karolinum Press; 2002; 121-31.
11. Kølvraa S., Christensen B., Lykke-Hansen L., Philip J. The fetal erythroblast is not the optimal target for non-invasive prenatal diagnosis: preliminary results. J. Histochem. Cytochem. 2005; 53(3):331-6.
12. Vona G., Beroud C., Benachi A., Quenette A., Bonnefont J.P., Romana S. et al. Enrichment, immunomorphological, and genetic characterization of fetal cells in maternal blood. Am. J. Pathol. 2002; 160(1):51-8.
13. Mouawia H., Saker A., Jais J.P., Benachi A., Bussières L., Lacour B. et al. Circulating trophoblastic cells provide genetic diagnosis in 63 fetuses at risk for cystic fibrosis or spinal muscular atrophy. Reprod. Biomed. Online. 2012; 25(5):508-20.
14. Sibiak R., Wender-Ozegovska E. Methods of detection and isolation of trophoblast cells from trans-cervical specimens – a historical overview. Medical Journal of Cell Biology. 2021;
9(4):170-6.
15. Cioni R., Bussani C., Scarselli B., Barciulli F., Bucciantini S., Simi P. Detection of fetal cells in intrauterine lavage samples collected in the first trimester of pregnancy. Prenat. Diagn. 2002; 22(1):52–5.
16. Cioni R., Bussani C., Scarselli B., Bucciantini S., Barciulli F., Scarselli G. et al. Fetal cells in cervical mucus in the first trimester of pregnancy. Prenat Diagn. 2003; 23(2):168–171.
17. Fang C.N., Kan Y.Y., Hsiao C.C. Detection of fetal cells from transcervical mucus plug before first-trimester termination of pregnancy by cytokeratin-7 immunohistochemistry. J Obstet Gynaecol Res. 2005; 31(6):500–7.
18. Imudia A.N., Suzuki Y., Kilburn B.A., Yelian F.D., Diamond M.P., Romero R. et al. Retrieval of trophoblast cells from the cervical canal for prediction of abnormal pregnancy: a pilot study. Hum Reprod. 2009; 24(9):2086-92.
19. Wu L., Li R., Ye O., Huang S. Application of Trophoblast in Noninvasive Prenatal Testing. Biomed. J. Sci & TechRes. 2020; 28(2):21381-7.
20. Bulmer J.N., Cioni R., Bussani C., Cirigliano V., Sole F., Costa C. et al. HLA-G positive trophoblastic cells in transcervical samples and their isolation and analysis by laser microdissection and QF-PCR. Prenat. Diagn. 2003; 23(1):34–9.
21. Burgemeister R. New aspects of laser microdissection in research and routine. Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 2005; 53(3):409–12.
22. Mantzaris D., Cram D.S. Potential of syncytiotrophoblasts isolated from the cervical mucus for early non-invasive prenatal diagnosis: Evidence of a vanishing twin. Clinica Chimica Acta. 2015 438:309–15.
23. Musatova E.V., Tveleneva A.A., Martynov A.V., Markova Z.G., Shilova N.V. Comparison of Amplification Methods of Single Trophoblast Cells for Their Subsequent Analysis Using Metaphase Comparative Genomic Hybridization. Genetika. 2018; 54(9):1111–6. (in Russian)
24. Moser G., Drewlo S., Huppertz B., Armant D.R. Trophoblast retrieval and isolation from the cervix: origins of cervical trophoblasts and their potential value for risk assessment of ongoing pregnancies. Hum. Reprod. Update. 2018; 24(4):484-96.
25. Ferreira L.M., Meissner T., Tiburgs T., Strominger J.L. HLA-G: at the interface of maternal-fetal tolerance. Trends in Immunology. 2017; 38(4):272-86.
26. Bolnick J.M., Kilburn B.A., Bajpayee S., Reddy N., Jeelani R., Crone B. et al. Trophoblast retrieval and isolation from the cervix (TRIC) for noninvasive prenatal screening at 5 to 20 weeks of gestation. Fertil. Steril. 2014; 102(1):135-142.e6.96.
27. Jain C.V., Kadam L., van Dijk M., Kohan-Ghadr H.R., Kilburn B.A., Hartman C., et al. Fetal genome profiling at 5 weeks of gestation after noninvasive isolation of trophoblast cells from the endocervical canal. Sci. Transl. Med. 2016; 8(363):363re4.
28. Musatova E.V., Kapustina M.V., Minzhenkova M.E., Markova Zh.G., Tarlycheva A.A., Shilova N.V. Use of cervical trophoblasts for non-invasive prenatal detection of frequent aneuploidies. Voprosy ginekologii, akusherstva I perinatologii. 2020; 19(4):75–80. (in Russian)
29. Suzuki T., Fujikura K. HigashiyamaT., Takata K. DNA staining for fluorescence and laser confocal microscopy. J. Histochem. Cytochem. 1997; 45 (1):49–53.
30. Tantengco O.A.G, Richardson L., Lee A., Kammala A.K, Kim S., Medina P.M.B. et al. Histocompatibility antigen, class I, G (HLAG)’s role during pregnancy and parturition: a systematic review of the literature. Life. 2021; 11:1061.
31. Bianchi D.W, Williams J.M, Sullivan L.M., Hanson F.W., Klinger K.W., Shuber A.P. PCR quantitation of fetal cells in maternal blood in normal and aneuploid pregnancies. Am. J. Hum.
Genet. 1997; 61:822-9.