Определение субпопуляций В-лимфоцитов периферической крови методом проточной цитофлуорометрии у здоровых лиц и больных ревматическими заболеваниями

Аннотация

Цель — использовать методику проточной цитофлуорометрии для иммунофенотипирования субпопуляций В-клеток периферической крови у здоровых лиц и больных ревматическими заболеваниями (РЗ). В периферической крови 27 здоровых доноров, 16 пациентов с ревматоидным артритом (РА) и 9 пациентов с системной красной волчанкой (СКВ) изучали относительное количество CD19
В-клеток, общей популяции В-клеток памяти (CD19
CD27
); непереключенных (CD19
IgD
CD27
) и переключенных (CD19
IgD
CD27
) В-клеток памяти, наивных (CD19
IgD
CD27
) и транзиторных (CD19
IgD
CD10
CD38
CD27
) В-клеток, плазмобластов (CD19
CD38
IgD
CD27
CD20
) и долгоживущих плазматических клеток (CD19
CD138
). Субпопуляции В-клеток определялись методом многоцветной проточной цитофлуорометрии с использованием панели моноклональных антител к поверхностным мембранным маркерам В-лимфоцитов. В норме относительное количество (медиана -Ме; интерквартильный размах 25-75 процентили) CD19
В-лимфоцитов составило 9,1 (6,6-11,6)%; CD19
CD27
В-клеток памяти — 2,2 (1,6-3,3)%; непереключенных и переключенных В-клеток памяти — 10 (6,4-12,7) и 17,7 (14,9-27,0)%; наивных В-клеток — 65,8 (55,1-73,4)%; транзиторных — 0,1 (0,1-0,3)%; плазмобластов — 7,0 (5,0-9,4)%. Долгоживущие плазматические клетки в периферической крови отсутствовали. У больных РА процентное содержание общей популяции В-клеток памяти было ниже, чем у доноров (1,6; 1,00-2,3%, р=0,038). При СКВ отмечено уменьшение количества наивных В-клеток (40,2; 19,7-58,2) и повышение уровня переключенных В-клеток памяти (34,2; 21,0-52,7) по сравнению с донорами (р=0,003 в обоих случаях). Достоверных различий в остальных субпопуляциях В-лимфоцитов между здоровыми донорами и пациентами с РА и СКВ не обнаружено (р>0,05). Разработанную методику многопараметрической проточной цитофлуорометрии можно рекомендовать для изучения гомеостаза В-клеток периферической крови у здоровых лиц и больных аутоиммунными РЗ, а также для оценки и прогнозирования эффективности анти-В-клеточной терапии.

Об авторах

Список литературы

Edwards J.C., Cambridge G. Sustained improvement in rheumatoid arthritis following a protocol designed to deplete B lymphocytes. Rheumatology. 2001; 40: 205-11.

Kim H.J., Berek C. B cells in rheumatoid arthritis. Arthritis Res. 2000; 2: 126-31.

Metlay J.P., Pure E., Steinman R.M. Control of the immune response at the level of antigen-presenting cells: a comparison of the function of dendritic cells and B lymphocytes. Adv. Immunol. 1989; 47: 45-116.

Takemura S., Klimiuk P.A., Braun A., Goronzy J.J., Weyand C.M. T cell activation in rheumatoid synovium is B cell dependent. J. Immunol. 2001; 167: 4710-18.

Lindenau S., Scholze S., Odendahl M., Dorner T., Radbruch A. et al. Aberrant activation of B cells in patients with rheumatoid arthritis. Ann. N. Y. Acad. Sci. 2003; 987: 246-8.

Brezinschek H.-P., Rainer F., Brickmann K., Graninger W.B. B lymphocyte-typing for prediction of clinical response to rituximab. Arthritis Res. Ther. 2012; 14: R161.

Vancsa A., Szabo Z., Szamosi S., Bodnar N., Vegh E., Gergely L. et al. Longterm effects of rituximab on B cell counts and autoantibody production in rheumatoid arthritis: use of high-sensitivity flow cytometry for more sensitive assessment of B cell depletion. J. Rheumatol. 2013; 40 (5): 565-71.

Sanz I., Wei C., Lee F.E., Anolik J. Phenotypic and functional heterogeneity of human memory B cells. Semin. Immunol. 2008; 20: 67-82.

Sims G.P., Ettinger R., Shirota Y., Yarboro C.H., Illei G.G., Lipsky P.E. Identification and characterization of circulating human transitional B cells. Blood. 2005; 105: 4390-8.

Ключевые слова