Аннотация
Для консервирования и пересылки по почте проб биологических жидкостей (прежде всего плазмы крови) в аналитическую лабораторию предлагается существенно модифицировать известный метод «сухой капли» крови (DBS, dried blood spot method) за счет использования отечественного фторопластового фильтрующего материала типа МФФК-Г в качестве пористого носителя жидкой биологической пробы. Синтетический материал не содержит химически активных молекулярных фрагментов и обладает вчетверо большей влагоемкостью, чем фильтровальная и хроматографическая бумага. Так, фторопластовый пористый диск массой 15 мг пригоден для нанесения 70-100 мкл (вместо 15-20 мкл) жидкости. Предварительная пропитка такого диска раствором антиоксиданта — 0,5-0,9% 2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенола в хлороформе — позволяет сильно повысить устойчивость высших полиненасыщенных жирных кислот (ЖК) в нанесенной на диск сухой пробе плазмы или эритроцитарной массы. Время хранения готового диска с сухой пробой на воздухе при комнатной температуре в этом случае возрастает с 3-4 до 35-40 дней, время хранения в морозильной камере — от 50-60 дней до полугода и более. Хранение сухих образцов в герметичных флаконах или виалах, продутых техническим пропан-бутаном, также увеличивает время хранения образцов примерно на порядок. Метод позволяет количественно определять содержание индивидуальных ЖК во фракции этерифицированных и неэтерифицированных ЖК, а также общего и свободного холестерина в пробах биологических жидкостей.
Список литературы
Титов В.Н., Эмануэль В.Л. Патогенез атеросклероза активирован, когда филогенетически травоядные животные начинают в избытке поедать мясную (плотоядную) пищу. Клиническая лабораторная диагностика. 2016; 61(9): 553
Galli C., Calder P.C. Effects of fat and fatty acid intake on inflammatory and immune responses: a critical review. Ann. Nutr. Metab. 2009; 55: 123-39.
Simopoulos A.P. Essential fatty acids in health and chronic disease. Am. J. Clin. Nutr. 1999; 70: 560-9.
Masood A., Stark K.D., Salem N. A simplified and efficient method for the analysis of fatty acid methyl esters suitable for large clinical studies. J. Lipid Res. 2005; 46: 2299-305.
Harris W.S., von Schacky C. The omega-3 Index: a new risk factor for death from coronary heart disease. Preventive Meditsine. 2004; 39: 212-20.
Титов В.Н., Ариповский А.В., Каба С.И., Колесник П.О., Веждел М.И., Ширяева Ю.К. Индивидуальные жирные кислоты в плазме крови, эритроцитах и липопротеинах. Сравнение результатов больных ишемической болезнью сердца и добровольцев. Клиническая лабораторная диагностика. 2012; 7: 3-8
Lorentzen B., Drevon C.A., Endersen M.J., Henriksen T. Fatty acid pattern of esterified and free fatty acids in sera of women with normal and pre-eclamptic pregnancy. Brit. J. Obstet. Gynaecol. 1995; 102(7): 530-7.
Colin A., Reggers J., Castronovo V., Ansseau M. Lipids, depression and suicide (review). Encephale. 2003; 29(1): 49-58.
Lehmann S., Delaby C., Vialaret J., Ducos J., Hirtz C. Current and future use of «dried blood spot» analysis in clinical chemistry. Clin. Chem. Lab. Med. 2013; 51(10): 1897-1909.
Bailey-Hall E., Nelson E.B., Ryan A.S. Validation of rapid measure of blood PUFA levels in humans. Lipids. 2008; 43(2): 181-6.
Crowe F.L., Skeaff C.M., Green T.J., Gray A.P. Serum fatty acids as biomarkers of fat intake predicts serum cholesterol concentrations in popular-based survey of New Zealand adolescents and adults. Amer. J. Clin. Nutr. 2006; 83(4): 887-9.
Metherel A.H., Stark K.D. A stability of blood fatty acids during storage and potential mechanisms of degradation: a review. Prostaglandins, Leukot. Essent. Fatty Acids. 2016; 104: 33-43.
Knapp D.R. Handbook of analytical derivatization reactions. «A Wiley-Interscience publication»; 1979.
Ариповский А.В., Колесник О.П., Веждел М.И., Титов В.Н. Метод подготовки проб для хроматографического определения жирных кислот без предварительной экстракции липидов. Клиническая лабораторная диагностика. 2012; 1: 3-6
Marangoni F., Colombo C., Galli C. A method for the direct evaluation of the fatty acid status in a drop of blood from a fingertip of humans: applicability to nutritional and epidemiological studies. Anal. Biochem. 2004; 326(2): 267-72.
Folch J., Lees M., Stanley G.H.S. A simple method for isolation and purification of total lipids from animal tissue. J. Biol. Chem. 1957; 226: 497-509.
Kuksis A., Myher J.J., Marai L., Geher K. Estimation of plasma free fatty acids as the trimethylsilyl (TMS) esters. Anal. Biochem. 1976; 70(2): 302-12.
Min Y., Ghebremeskel K., Geppert J., Khalil F. Effect of storage temperature and length on fatty acid composition of fingertip blood collected on filter paper. Prostaglandins, Leukot. Essent. Fatty Acids. 2011; 84(1-2): 13-8.
Bell J.G., Mackinlay E.E., Dick J.R., Younger I., Lands B. Using a fingertip whole blood sample for rapid fatty acid measurement: method validation and correction with erythrocyte polar lipid composition in UK subjects. Brit. J. Nutr. 2011; 106(9): 1408-15.
Otto S.J., van Drongelen M.M., van Houwelingen A.C., Hornstra G. Effect of storage of venous and capillary blood samples — the influence of deferoxamine and butylated hydroxytoluene on the fatty acid alterations in red-blood-cell phospholipids. Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1997; 35: 907-13.
Metherel A.H., Hogg R.C., Buzikievich L.M., Stark K.D., Butylated hydroxytoluene can protect polyunsaturated fatty acids in dry blood spots from degradation for up to 8 weeks at room temperature. Lipids Health Dis., 12: 22. Published on-line, 2013, Feb 20, doi: 10.1186/1476-511X-12-22.
Рейтлингер С.А. Проницаемость полимерных материалов. М.: «Химия»;1974