Научно-практический журнал Клиническая лабораторная диагностика

ПОЛИПЕПТИДЫ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОЙ ФРАКЦИИ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА С ПРЯМОЙ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Doi: 10.51620/0869-2084-2025-70-10-683-691 EDN: ONBMQW ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Купить
Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Цель исследования — выявление значимых по антимикробной активности полипептидов сыворотки крови, содержащихся во фракции с молекулярной массой ниже 100 кДа.
Материал и методы. Данную фракцию получали пропусканием пуловой сыворотки крови от 5 здоровых доноров через молекулярный мембранный фильтр; протеом фракции изучали методом хромато-масс-спектрометрии (МС). Величины минимальных ингибирующих концентраций (МИК) серотрансферрина и альбумина по отношению к условно-патогенным микроорганизмам (УПМ) оценивали методом микроразведений в жидких питательных средах.
Результаты. Концентрацию известных антимикробных полипептидов (АМПП) в сыворотке крови человека сравнили с соответствующими им опубликованными референс-величинами МИК в отношении условно-патогенных микроорганизмов (УПМ): Candida albicans, Staphylococcus aureus, Escherichia coli; оказалось, что наиболее значимыми должны явиться лизоцим и липокалин. МС указанной фракции показала, что чувствительность метода из всех описанных АМПП позволяет определить лишь лизоцим, причем в количестве 0,044% от всех белков фракции. При этом среди полипептидов с содержанием ≥1% обнаружены 10 белков, которые, по данным литературы, могут непосредственно действовать против микроорганизмов, но ни один из них не цитируется в обзорах, посвященных АМПП. Для некоторых АМПП известны величины МИК, а у аполипопротеина А-1, альфа-1-антитрипсина, аполипопротеина A-II, тимозина β-4 — пределы МИК сравнимы с их концентрацией в плазме крови. Определены величины МИК двух АМПП — альбумина и серотрансферрина. Установлено, что серотрансферрин слабо влиял на рост C. albicans, но заметно снижал накопление биомассы S. aureus и E. coli в диапазоне 1,4-5,4 мг/мл, что соответствует его физиологическим уровням в плазме крови. Альбумин не отличался ярковыраженным антимикробным действием, но сильнее влиял на C. albicans и S. aureus, чем на E. coli, причем величины МИК соответствовали диапазону 25-50 мг/мл, что сравнимо с его физиологическими концентрациями.
Обсуждение. Традиционно изучаемые АМПП в отдельности, очевидно, не играют существенной роли в защите кровотока от микроорганизмов, за исключением синергического эффекта. Полипептиды, ранее не рассматриваемые в качестве АМПП, но присутствующие в кровотоке в высоких концентрациях и обладающие прямой антимикробной активностью, наряду с иммунокомпетентными клетками, являются «первой линией» защиты кровотока от УПМ.
Заключение. В связи с растущей резистентностью микроорганизмов к антимикробным препаратам (АМП) необходимо изучение защитного потенциала самого человека — АМПП, обладающих непосредственным действием на патогены. Выявление перспективных АМПП открывает возможности для создания АМП нового поколения.

Annotation

The aim of this study was to identify the most significant antimicrobial serum polypeptides contained in the fraction with a molecular weight below 100 kDa.
Material and methods. This fraction was obtained by passing pooled serum from 5 healthy donors through a molecular membrane filter; the fraction proteome was studied by chromatography-mass spectrometry (MS). The values of minimum inhibitory concentrations (MIC) of serotransferrin and albumin in relation to opportunistic microorganisms (OPM) were estimated using the microdilution method in liquid nutrient media.
Results. The concentration of known antimicrobial polypeptides (AMPP) in human blood serum was compared with the corresponding published MIC reference values for opportunistic microorganisms (OPM): Candida albicans, Staphylococcus aureus, Escherichia coli; it turned out that lysozyme and lipocalin should be the most significant. MS of the specified fraction showed that the sensitivity of the method of all described AMPP allows only lysozyme to be determined, and in an amount of 0.044% of all proteins in the fraction. Moreover, among polypeptides with a content of ≥1%, 10 proteins were found that, according to the literature, can directly act against microorganisms, but none of them are cited in reviews devoted to AMPP. For some AMPP, MIC values are known, and for apolipoprotein A-1, alpha-1-antitrypsin, apolipoprotein A-II, and thymosin β-4, the MIC ranges are comparable to their concentrations in blood plasma. The MIC values of two AMPP — albumin and serotransferrin — were determined. It was found that serotransferrin had a weak effect on the growth of C. albicans, but significantly reduced the accumulation of S. aureus and E. coli biomass in the range of 1.4-5.4 mg/ml, which corresponds to its physiological levels in blood plasma. Albumin did not have a pronounced antimicrobial effect, but had a stronger effect on C. albicans and S. aureus than on E. coli, with MIC values in the range of 25-50 mg/ml, which is comparable to its physiological concentrations.
Discussion. Traditionally studied AMPP individually apparently do not play a significant role in protecting blood flow, except for a possible synergistic effect. Polypeptides previously not considered as AMPP, but present in the bloodstream in high concentrations and possessing direct antimicrobial activity, along with immunocompetent cells, are the «first line» of bloodstream defense against OMP.
Conclusion. In connection with the growing resistance of microorganisms to antimicrobial drugs (AMP), it is necessary to study the protective potential of the human himself — AMPP, which have a direct effect on pathogens. Identification of promising AMPP opens up opportunities for the creation of a new generation of AMPP.
Key words: blood serum; antimicrobial polypeptides; antimicrobial activity; serotransferrin

Для цитирования:

Арзуманян В.Г., Иксанова А.М., Колыганова Т.И., Миронов А.Ю., Вартанова Н.О., Поддубиков А.В. Полипептиды низкомолекулярной фракции сыворотки крови человека с прямой антимикробной активностью. Клиническая лабораторная диагностики. 2025; 70(10): 683-691
DOI: https://doi.org/10.51620/0869-2084-2025-70-10-683-691
EDN: ONBMQW

For citation:

Arzumanian V.G., Iksanova A.M., Kolyganova T.I., Mironov A.Yu., Vartanova N.O., Poddubikov A.V. Polypeptides of low molecular weight fraction of human blood serum with direct antimicrobial activity. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics). 2025; 70(10): 683-691 (in Rus.)
DOI: https://doi.org/10.51620/0869-2084-2025-70-10-683-691
EDN: ONBMQW