Разработка иммуноферментных тест-систем для детекции потенциально пандемических вирусов гриппа субтипов A(H2), A(H5), A(H7) и A(H9)

Аннотация

Цель работы: разработка диагностических тест-систем, сконструированных по принципу «сэндвич» ИФА, для детекции антигенов вирусов гриппа, обладающих пандемическим потенциалом: A(H2), A(H5), A(H7) и A(H9). Получены и охарактеризованы панели субтипоспецифичныхмоноклональных антител (МКА), взаимодействующих с молекулой гемагглютинина потенциально пандемических вирусов гриппа. Для вирусов каждого субтипа были подобраны пары МКА/конъюгат МКА с пероксидазой хрена, наиболее эффективно взаимодействующие с вирусом-иммуногеном и не обладающие неспецифической активностью по отношению к вирусам гриппа гетерологичных субтипов. С учетом установленных пороговых значений чувствительность тест-систем варьировала в зависимости от субтипа и штамма вирусов в пределах 4-30 нг/мл при оценке вирусных очищенных концентратов и 0,3-8 гемагглютинирующих единиц при анализе вируссодержащей аллантоисной жидкости. Специфичность ИФТС проявилась в отсутствии неспецифических взаимодействий с гетерологичными вирусами, как сезонными, так и потенциально пандемическими. Метод может быть использован для быстрой идентификации вирусов гриппа, нетипируемых при рутинной работе практических лабораторий.

Об авторах

Список литературы

Richard M., Fouchier R.A. Influenza A virus transmission via respiratory aerosols or droplets as it relates to pandemic potential. FEMS Microbiol. Rev. 2016; 40(1): 68-85.

Jin X.W., Mossad S.B. Avian influenza: an emerging pandemic threat. Cleve. Clin. J. Med. 2005; 72(12): 1129-34.

Pandemic influenza preparedness and response: a WHO guidance document. Available at: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NB K143062/.

Fouchier R.A., Schneeberger P.M., Rozendaal F.W., Broekman J.M., Kemink S.A., Munster V. et al. Avian influenza A virus (H7N7) associated with human conjunctivitis and a fatal case of acute respiratory distress syndrome. Proc. Natl. Acad. Sci.USA. 2004; 101(5): 1356-61.

Gao R., Cao B., Hu Y., Feng Z., Wang D., Hu W. et al. Human infection with a novel avian-origin influenza A(H7N9) virus. N. Engl. J. Med. 2013; 368(20): 1888-97.

WHO Monthly risk assessment summary influenza at the humananimal interface. Available at: https://www.who.int/influenza/human_animal_interface/HAI_Risk_Assessment/en/.

Zhang Q., Shi J., Deng G., Guo J., Zeng X., He X. et al. H7N9 influenza viruses are transmissible in ferrets by respiratory droplet. Science. 2013; 341(6144): 410-4.

Nabel G.J., Wei C.J., Ledgerwood J.E. Vaccinate for the next H2N2 pandemic now. Nature. 2011; 471(7337): 157-8.

Ma M.J., Yang X.X., Qian Y.H., Zhao S.Y., Hua S., Wang T.C. et al. Characterization of a novel reassortant influenza A virus (H2N2) from a domestic duck in Eastern China. Sci. Rep. 2014; 4: 7588.

Antigenic and genetic characteristics of zoonotic influenza viruses and development of candidate vaccine viruses for pandemic preparedness. Wkly. Epidemiol. Rec. 2015; 90(12): 109-20.

Matrosovich M.N., Krauss S., Webster R.G. H9N2 influenza A viruses from poultry in Asia have human virus-like receptor specificity. Virology. 2001; 281(2): 156-62.

Соминина А.А., Кривицкая В.З., Войцеховская Е.М, Медведева Н.А., Липина Н.В., Потапенко Л.Б. Практические рекомендации по диагностике вирусных инфекций. СПб.; 2005.

Ключевые слова