СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ПРИ ИДЕНТИФИКАЦИИ КОРИНЕБАКТЕРИЙ

Аннотация

При проведении лабораторной диагностики дифтерийной инфекции необходимо выявление возбудителя в оптимально сжатые сроки с обязательной постановкой биохимических тестов.
Цель: совершенствование бактериологического метода при идентификации коринебактерий в рамках разработки нового
МУК 4.2.3852-23 «Лабораторная диагностика дифтерийной инфекции».
Материал и методы. Использованы коммерческие стандартизованные сухие питательные среды промышленного производства и лабораторного приготовления. Результаты и обсуждение. Анализ плотных питательных сред, используемых для
первичного посева материала, показал недостаточность дифференцирующих признаков, в связи с общностью ряда ферментативных и культуральных свойств, поэтому выделены ключевые культуральные свойства на питательных средах, по
совокупности которых можно чётко дифференцировать виды коринебактерий. Доказано, что использование питательной
среды Тинсдаля без постановки пробы Пизу не ускоряет выдачу ответа.
Заключение. Питательная среда Тинсдаля не обеспечивает должную ингибицию грамположительной микрофлоры. При
использовании железо-глюкозо-лактозного агара с мочевиной при определении уреазной активности наблюдается слабоположительный результат, что затрудняет интерпретацию данного теста. Показана корректность выбора сухой питательной среды № 7 ГРМ, облегчающей процесс определения нитратредуктазной активности в сравнении с питательными
средами, требующими дополнительного внесения нитрата калия.

Annotation

When carrying out laboratory diagnostics of diphtheria infection, it is necessary to identify the pathogen in the shortest possible time with the mandatory setting of biochemical tests.
Purpose. Improvement of the bacteriological method for the identification of corynebacteria within the framework of the development
of the new MUK 4.2.3852-23 «Laboratory diagnostics of diphtheria infection».
Material and methods. Commercial standardized dry culture media of industrial production and laboratory preparation were used.
Results and discussion. The analysis of dense nutrient media used for primary seeding of the material showed the insufficiency of
differentiating traits, due to the commonality of a number of enzymatic and cultural properties, therefore, the key cultural properties
on nutrient media were identified, according to the totality of which it is possible to clearly differentiate the species of corynebacteria.
It has been proven that the use of Tinsdahl culture medium without a Pizu test does not speed up the response.
Conclusion. Tinsdal’s culture medium does not provide proper inhibition of gram-positive microflora. When iron-glucose-lactose agar
is used with urea, a weakly positive result is observed in determining urease activity, which makes it difficult to interpret this test. The
correctness of the choice of dry nutrient medium № 7 of the timing system is shown, which facilitates the process of determining nitrate
reductase activity in comparison with nutrient media requiring additional application of potassium nitrate.
Key words: biochemical identification; Corynebacterium diphtheriae; cystinase activity; urease activity; nitrate reductase activity

Об авторах

Список литературы

Л И Т Е Р А Т У Р А ( П П . 4 — 6 , 9 С М .
REFERENCES)
1. Харсеева Г.Г., Воронина Н.А., Миронов А.Ю. Методы идентификации Corynebacterium non diphtheriaе. Клиническая лабораторная
диагностика. 2016; 61(4): 245-9. DOI:10.18821/0869-2084-2016-
4-245-249.
2. Борисова О.Ю., Чагина И.А., Гадуа Н.Т., Пименова А.С., Полосенко О.В., Храмов М.В., Требунских И.П., Сидорова Н.А., Алексеева
И.Н., Миронов А.Ю. Особенности применения среды Пизу в бактериологической диагностике дифтерии в современных условиях. Клиническая лабораторная диагностика. 2024; 68(10): 620-6.
DOI: 10.51620/0869-2084-2023-68-10-620-626.
3. Руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций.
Книга II. Лабинская А.С., Костюкова Н.Н., Иванова С.М., ред.
М.: БИНОМ; 2012.
7. Клиническая лабораторная аналитика. Том IV. Частные аналитические технологии в клинической лаборатории. Меньшиков В.В.,
ред. М.: Агат-Мед; 2003.
8. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Биргер М.О., ред. 3-е изд. перераб. и доп. М.:
Медицина; 1982.
10. Харсеева Г.Г., Тюкавкина С.Ю., Миронов А.Ю. Дифтерия: характеристика возбудителя и лабораторная диагностика (лекция). Клиническая лабораторная диагностика. 2020; 65 (11): 699-706. DOI:
10.18821/0869-2084-2020-65-11-699-706.
11. Шепелин А.П., Полосенко О.В., Борисова О.Ю., Пименова А.С.,
Гадуа Н.Т. Сравнительная характеристика питательных сред для
выделения коринебактерий. Клиническая лабораторная диагностика. 2016; 61(1): 59-64.
12. Шепелин, И.А., Миронов А.Ю., Шепелин К.А. Питательные среды: Справочник бактериолога. 2-е изд. М.: ЗАО «А-Принт»; 2015.
ISBN 978-5-9905485-3-4.

REFERENCES
1. Kharseeva G.G., Voronina N.A., Mironov A.Yu. Methods of
identification of Corynebacterium non-diphtheria. Klinicheskaya
Laboratornaya Diagnostika. 2016; 61(4): 245-9. DOI:
10.18821/0869-2084-2016-4-245-249. (in Russian)
2. Borisova O.Yu., Chagina I.A., Gadua N.T., Pimenova A.S., Polosenko
O.V., Khramov M.V., Trebunskikh I.P., Sidorova N.A., Alekseyeva
I.N., Mironov A.Yu. Features of the application of the Pisa medium
in the bacteriological diagnosis of diphtheria in modern conditions.
Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2024; 68(10): 620-6.
DOI: 10. 51620/0869-2084-2023-68-10-620-626. (in Russian)
3. A guide to medical microbiology. Private medical microbiology and
etiological diagnosis of infections. Book II. Labinskaya A.S., Kostyukova N.N., Ivanova S.M., eds. Moscow: BINOM; 2012. (in Russian)
4. Tinsdale G. F. W. A new medium for the isolation and identification
of Cdiphtheriae based on the production of hydrogen sulphide. Journal of Pathology and Bacteriology. 1947; 59: 461.
5. Billings E. An investigation of Tinsdale’s Tellurite Medium, its usefullness and mechanism of halo formation. Thesis Univ. Michigan; 1956.
6. Fontana I., Bertocchi M., Rossi A., Gasloli G., Santori G., Ferro C.
et al. Corynebacterium urealyticum infection in a pediatric kidney
transplant recipient: case report. Transplant. Proc. 2010; 42 (4):
1367-8. DOI: 10.1016/j.transproceed.2010.03.054.
7. Clinical laboratory analysis. Volume IV. Private analytical technologies in the clinical laboratory. Men′shikov V.V., ed. Moscow: AgatMed; 2003: 816. (in Russian)
8. Handbook of microbiological and virological research methods.
Birger M.O., 3rd ed. Moscow: Meditsina; 1982. (in Russian)
9. Available at: https://www.microbiologyinpictures.com/bacteria
Reverse test CAMP (accessed 4 April 2024).
10. Kharseeva G.G., Tyukavkina S.Yu., Mironov A.Yu. Diphtheria:
characteristics of the pathogen and laboratory diagnostics (lecture).
Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2020; 65 (11): 699-706.
DOI: 10.18821/0869-2084-2020-65-11-699-706. (in Russian)
11. Shepelin A.P., Polosenko O.V., Borisova O.Yu., Pimenova A.S., Gadua N.T. Comparative characteristics of culture media for the isolation
of corynebacteria. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika. 2016;
61(1): 59-64. (in Russian)
12. Shepelin I.A., Mironov A.Yu., Shepelin K.A. Culture media: Handbook of bacteriology. 2nd ed. Moscow: A-Print; 2015. ISBN 978-5-
9905485-3-4. (in Russian).

Ключевые слова