СРАВНЕНИЕ ДИАЗО- И ВАНАДАТОКСИДАЗНОГО МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИЛИРУБИНА И ЕГО ФРАКЦИЙ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ ГИПЕРЛИПИДЕМИИ И ГЕМОЛИЗЕ НА АВТОМАТИЧЕСКИХ АНАЛИЗАТОРАХ DIRUI СЕРИИ CS

Аннотация

Определяли концентрацию общего и прямого билирубина в 405 образцах сыворотки крови на автоматическом биохимическом анализаторе DIRUI CS-T240 PLUS диазометодом (DIRUI INDUSTRIAL CO., LTD, Китай) и методом окисления ванадата (DIRUI INDUSTRIAL CO., LTD, Китай). Проводилась оценка сравнимости результатов определения билирубина и его фракций между выбранными методиками. Далее в опытных пробах моделировали различные уровни гемолиза (HI) и липемии (LI) с последующим определением общего и прямого билирубина двумя методиками. Оба метода продемонстрировали высокую корреляцию в диапазоне рассмотренных значений 2,0-284,0 мкмоль/л (r=0,984). Диазометод показал высокую чувствительность к гемолизу и липемии: для общего билирубина при значениях HI=100 ед и LI=30 ед, а для прямого билирубина уже при HI и LI 30 ед. Для метода окисления ванадата при определении общего билирубина предел индекса гемолиза и липемии составил 500 ед, а для прямого билирубина HI=500 ед и LI=150 ед. Метод окисления ванадата более устойчив к интерференциям гемолиза и липемии, что особенно важно в практике педиатрических и гематологических отделений, отделениях экстренной помощи. Ввиду ограничений доступности и более высокой стоимости реактивов для данной методики целесообразно в клинико-диагностической лаборатории при определении концентрации билирубина и его фракций использовать диазометод в качестве основного и метод с ванадатоксидазой для гемолизированных и липемичных образцов.

Annotation

analyser using the diazo method (DIRUI INDUSTRIAL CO., LTD, China) and the vanadate oxidation method (DIRUI INDUSTRIAL CO., LTD, China). The comparability of the results of the determination of bilirubin and its fractions between the selected methods was evaluated. In addition, different levels of haemolysis (HI) and lipemia (LI) were simulated in experimental samples with subsequent determination of total and direct bilirubin by two methods. Both methods showed a high correlation within the considered range of values, 2.0-284.0 μmol/l (r=0.984). The diazo method showed high sensitivity to haemolysis and lipemia: for total bilirubin at values of HI=100 units and LI=30 units, and for direct bilirubin even at HI and LI 30 units. For the vanadate oxidation method for total bilirubin, the limit of haemolysis and lipemia index was 500 units and for direct bilirubin – HI=500 and LI=150 units. The vanadate oxidation method is more resistant to hemolysis and lipemia interference, which is especially important in the practice of pediatric and hematology departments, emergency departments. Due to the limited availability and higher cost of reagents for this method, it is advisable to use diazo reaction as the main method and method with vanadate oxidase for hemolyzed and lipemic samples in the clinical diagnostic laboratory when determining the concentration of bilirubin and its fractions.
Key words: bilirubin; hemolysis; lipemia; vanadate oxidation; diazo method

Об авторах

Список литературы

1. Lippi G., Becan-McBride K., Behulova D., Bowen R.A., Church S., Delanghe J. et al. Preanalytical quality improvement: in quality we trust. Clinical chemistry and laboratory medicine. 2013; 51(1): 229–41. DOI: 10.1515/cclm-2012-0597.
2.Lippi G., von Meyer A., Cadamuro J. Simundic A-M. Blood sample quality. Diagnosis. 2019; 6(1): 25-31. DOI: 10.1515/dx-2018-0018.
3.Tian G., Wu Y., Jin X., Zeng Z., Gu X., Li T. et al. The incidence rate and influence factors of hemolysis, lipemia, icterus in fasting serum biochemistry specimens. PloS Оne. 2022; 17(1): e0262748. DOI: 10.1371/journal.pone.0262748.
4.Delgado J.A., Morell-Garcia D., Bauca J.M. Hemolysis interference studies: the particular case of sodium ion. EJIFCC. 2019: 30(1): 25–34.
5.Tóth J., Oláh A.V., Petercsák T., Kovács T., Kappelmayer J. Detection of haemolysis, a frequent preanalytical problem in the serum of newborns and adults. EJIFCC. 2020; 31(1): 6–14.
6.Kumari S., Kumar S., Bharti N., Shekha R. Impact of pneumatic transport system on preanalytical phase affecting clinical biochemistry results. Journal of laboratory physicians. 2022; 15(1): 48–55. DOI: 10.1055/s-0042-1750077.
7.Nikolac N. Lipemia: causes, interference mechanisms, detection and management. Biochemia medica. 2014; 24(1): 57–67. DOI: 10.11613/BM.2014.008.
8.Marques-Garcia F. Methods for hemolysis interference study in laboratory medicine — a critical review. EJIFCC. 2020; 31(1): 85–97.
9.Köhne I. Haemolysis induced by mechanical circulatory support devices: unsolved problems. Perfusion. 2020; 35(6): 474–83. DOI: 10.1177/0267659120931307.
10.Dhungana N., Morris C., Krasowski MD. Operational impact of using a vanadate oxidase method for direct bilirubin measurements at an academic medical center clinical laboratory. Pract. Lab. Med. 2017; 8: 77-85. DOI: 10.1016/j.plabm.2017.05.004.
11.Klimenkova O.A., Berestovskaja V.S., Laricheva E.S. Hemolysis index: from discussion to solving preanalytical quality problems. Meditsinskiy alfavit. 2013; 3(16): 38-40. (in Russian)
12.Klimenkova O.A., Zheltyakova O.V., Berestovskaya V.S., Laricheva E.S. Visual evaluation of hemolysis is a look at the tip of the iceberg. Poliklinika. 2013; 4(1): 43-7. (in Russian)
13.Agarwal S., Vargas G., Nordstrom C., Tam E., Buffone G.J., Devaraj S. Effect of interference from hemolysis, icterus and lipemia on routine pediatric clinical chemistry assays. Clin. Chim. Acta. 2015; 438:241-5. DOI: 10.1016/j.cca.2014.08.008.
14.Soleimani N., Mohammadzadeh S., Asadian F. Lipemia interferences in biochemical tests, investigating the efficacy of different removal methods in comparison with ultracentrifugation as the gold standard. J. Anal. Methods Chem. 2020; 2020:9857636.
15.Statland B.E. Clinical decision levels for laboratory tests. Oradell NJ: Medical Economics Books; 1987.
16.Klimenkova O.A., Berestovskaya V.S., Ivanov G.A., Emanuel A.V. Experience of using hemolysis index as the pre-analytical quality indicator in immunochemical tests. Vestnik Roszdravnadzora. 2014; 3: 33-8. (in Russian)
17.Klimenkova O.A., Berestovskaya V.S., Laricheva E.S. Prevalence of lipemia among outpatients. Poliklinika. 2014; 4(1): 8-10. (in Russian)
18.Stirling K.J., Kaempf J.W., Wang L., Luzzi V.I., McDonald J.V. Overdiagnosis of Newborn Hyperbilirubinemia: A Natural Experiment in Quality Improvement Fundamentals. Pediatr. Qual. Saf. 2023; 8(4): e675. DOI: 10.1097/pq9.0000000000000675.

Ключевые слова