СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ И КОММЕРЧЕСКИХ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ ТЕСТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТИВОТУЛЯРЕМИЙНЫХ АНТИТЕЛ У ЛЮДЕЙ

Аннотация

Разработаны экспериментальные серологические тесты для определения противотуляремийных антител у людей в форматах иммунохроматографии (ИХ-тест ЛПС Ft15) и иммуноферментного анализа (ИФА ЛПС Ft15) с использованием в качестве антигена высокоочищенного ЛПС F. tularensis 15 НИИЭГ. Проведён анализ чувствительности и специфичности разработанных тестов и коммерческого туляремийного диагностикума РНГА-Тул-Аг-СтавНИПЧИ (производства Ставропольского научно-исследовательского противочумного института) в сравнении с коммерческим референс-диагностикумом, зарегистрированным в РФ для количественного определения туляремийных IgG человека — ELISA classic Francisella tularensis IgG SERION, Германия (ELISA IgG SERION). Исследование проб сывороток крови людей, вакцинированных против туляремии, показало, что чувствительность и специфичность детекции противотуляремийных антител с помощью ИФА ЛПС Ft15 при сравнении с ELISA IgG SERION составили 97,7 и 100%. При определении противотуляремийных антител диагностикумом ИХ-тест ЛПС Ft15 данные параметры составили по сравнению с ELISA IgG SERION 94,3 и 100%. Чувствительность и специфичность РНГА-Тул-Аг-СтавНИПЧИ составили по сравнению с ELISA IgG, SERION 59,1 и 80%.

Об авторах

Список литературы

Бачинский А.Г., Низоленко Л.Ф. Оценка влияния мер противодействия на последствия локальных эпидемий, вызываемых возбудителями особо опасных инфекций. Проблемы особо опасных инфекций. 2015; 2: 9-12

Rotz, L.D., Khan A.S., Lillibridge S.R., Ostroff S.M., Hughes J.M. Public health assessment of potential biological terrorism agents. Emerg. Infect. Dis. 2002; 14(2): 225-30.

Oyston P.C., Sjostedt A., Titball R.W. Tularaemia: bioterrorism defense renews interest in Francisella tularensis. Nat. Rev. Microbiol. 2004 ; 2: 967-78.

Maurin M. Francisella tularensis as a potential agent of bioterrorism? Expert Rev. Anti Infect. Ther. 2015; 13: 141-4.

Павлов В.М., Козлова И.И., Мокриевич А.Н., Шутко О.Д., Тимофеев В.С., Миронова Р.И., Кузнецова Т.С., Файзуллина Н.М., Кудрявцева Т.Ю., Комбарова Т.И., Дятлов И.А. Характеристика штаммов туляремийного микроба, выделенных от больных людей и мелких грызунов во время эпидемии туляремии в Ханты-Мансийске в 2013 г. Проблемы особо опасных инфекций. 2015; 2: 58-62.

Государственный доклад «О санитарно-эпидемиологической обстановке на территории Ханты-Мансийского автономного округа — Югры в 2013 году». Югра: Управление Роспотребнадзора по ХМАО-Югре; 2014.

Боронина Л.Г., Лахно Т.И., Борзунов В.М, Чмелёв С.А. Активация очагов туляремии в уральском федеральном округе. Сборник материалов Всероссийской научно-практической конференции — «Инновации в медицинской, фармацевтической, ветеринарной и экологической микробиологии». СПб.: Человек и его здоровье; 2017.

Hepburn M.J., Simpson A.H. Tularemia: current diagnosis and treatment options. Expert Rev Anti Infect Ther. 2008; 6: 231-40.

Tärnvik A., Chu M.C. New approaches to diagnosis and therapy of tularemia. Ann. N. Y. Acad. Sci. 2007; 1105: 378-404.

Karagöz S., Kiliç S., Berk E., Uzel A., Çelebi B., Çomoğlu Ş., Karagöz A., Akyar I., Can S. Francisella tularensis bacteremia: report of two cases and review of the literature. New Microbiol. 2013; 36: 315-23.

Shapiro D.S., Schwartz D.R. Exposure of laboratory workers to Francisella tularensis despite a bioterrorism procedure. J.Clin. Microbiol. 2002; 40: 2278-81.

Сырова, Н.А., Терешкина Н.Е., Девдариани З.Л. Современное состояние иммунодиагностики туляремии. Проблемы особо опасных инфекций. 2008; 97: 12-15

Schmitt P., Splettstoesser W., Porsch-Ozcürümez M., Finke E.J., Grunow R. A novel screening ELISA and a confirmatory Western blot useful for diagnosis and epidemiological studies of tularemia. Epidemiol. Infect. 2005; 133: 759-66.

Yanes, H. et al. Evaluation of in-house and commercial serological tests for diagnosis of human tularemia. J.Clin. Microbiol. 2018; 56: 1440-7.

Behan K.A., Klein G.C. Reduction of Brucella species and Francisella tularensis cross-reacting agglutinins by dithiothreitol. J. Clin. Microbiol.1982; 16: 757-6.

Bevanger L., Maeland J.A., Naess A.I. Agglutinins and antibodies to Francisella tularensis outer membrane antigens in the early diagnosis of disease during an outbreak of tularemia. J. Clin. Microbiol. 1988; 26: 433-7.

Chaignat V., Djordjevic-Spasic M., Ruettger A., Otto P., Klimpel D., Müller W., Tomaso H. Performance of seven serological assays for diagnosing tularemia. BMC Infectious Diseases. 2014; 14: 234.

Kilic S., Celebi B., Yesilyurt M. Evaluation of a commercial immunochromatographic assay for the serologic diagnosis of tularemia. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 2012; 74 (1): 1-5.

Porsch-Ozcurumez M., Kischel N., Priebe H., Splettstoesser W., Finke E.J., and Grunow R. Comparison of enzyme-linked immunosorbent assay, Western blotting, microagglutination, indirect immunofluorescence assay, and flow cytometry for serological diagnosis of tularemia. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2004; 11: 1008-15.

Sharma N., Hotta A., Yamamoto Y., Fujita O., Uda A., Morikawa S., Yamada A., Tanabayashi K. Detection of Francisella tularensis-specific antibodies in patients with tularemia by a novel competitive enzyme-linked immunosorbent assay. Clin Vaccine Immunol. 2013; 20: 9-16.

Аронова H.B., Павлович Н.В. Сравнительный анализ иммунного ответа кролика на антигены живых и убитых бактерий рода Francisella. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2001; 2: 26-30

Sandstrom G., Sjostedt A., Johansson T., Kuoppa K., and Williams J. C. Immunogenicity and toxicity of lipopolysaccharide from Francisella tularensis LVS. FEMS Microbiol. Immunol. 1992; 5: 201-10.

Splettstoesser W., Guglielmo-Viret V., Seibold E., Thullier P. Evaluation of an immunochromatographic test for rapid and reliable serodiagnosis of human tularemia and detection of Francisella tularensis-specific antibodies in sera from different mammalian species. J. Clin. Microbiol. 2010; 48(5): 1629-34.

Westphal O., Jann K. Bacterial Lipopolysaccharides. Extraction with Phenol-Water and Further Applications of the Procedure. Methods in Carbohydrate Chemistry. 1965; 5: 83-91.

Wetmur J.G., Davidson N.J. Kinetics of renaturation of DNA. J. Mol. Biol. 1968; 31: 349.

Twine S.M., Petit M.D., Fulton K.M., House R.V., Conlan J.W., Tripp R., eds. Immunoproteomics Analysis of the Murine Antibody Response to Vaccination with an Improved Francisella tularensis Live Vaccine Strain (LVS). PLoS ONE. 2010; 5: 100-2.

Laemmli U. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970; 227: 680-5.

Остерман JI.A. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: Электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). М.: Наука; 1981

Tsai C.M., Frash C.E. A sensitive silverstain for detecting lipopolysaccharides in polyacrylamide gels. Anal. Biochem. 1982; 119.

Bradford M.M. A rapid and sensitive method for quantification of microgramm quantities of protein. Utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 1976; 72: 248-254.

Lowry O.H., Rosenbrough N.R., Farr A.L. et al. Protein measurement with the folin phenol. J. Biol. Chem. 1951; 193: 115-9.

Егоров А.М., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высшая Школа; 1991

Sandstrom G., Tarnvik A., Wolf-Watz H., and Lofgren S. Antigen from Francisella tularensis: nonidentity between determinants participating in cell-mediated and humoral reactions. Infect. Immun. 1984; 45: 101-6.

Koskela P., and Herva E. Cell-mediated immunity against Francisella tularensis after natural infection. Scand. J. Infect. Dis. 1980; 12: 281-7.

Tarnvik A., Lofgren M. L., Lofgren S., Sandstrom G., and Wolf-Watz H. Long-lasting cell-mediated immunity induced by a live Francisella tularensis vaccine. J. Clin. Microbiol. 1985; 22: 527-30.

Tarnvik A., and Lofgren S. Stimulation of human lymphocytes by a vaccine strain of Francisella tularensis. Infect. Immun. 1975; 12: 951-7.

Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика; 1998

Sharma N., Hotta A., Yamamoto Y., Uda A., Fujita O., Mizoguchi T., Shindo J., Park C.H., Kudo N., Hatai H., Oyamada T., Yamada A., Morikawa S., Tanabayashi K. Serosurveillance for Francisella tularensis among wild animals in Japan using a newly developed competitive enzyme-linked immunosorbent assay. Vector Borne Zoonotic Dis. 2014; 14(4): 234

Ключевые слова