Научно-практический журнал Клиническая лабораторная диагностика

Автоматизированный анализ антинуклеарных антител методом непрямой реакции иммунофлюоресценции с использованием HEp-2-клеток

Александрова Елена Николаевна

ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Посмотреть или загрузить статью

Скачать
Читать
Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Выявление антинуклеарных антител (АНА) в сыворотке крови на основе непрямой реакции иммунофлюоресценции (НРИФ) с использованием клеток линии HEp-2 (НРИФ-HEp-2) - золотой стандарт и ключевой скрининговый метод лабораторной диагностики аутоиммунных ревматических заболеваний (РЗ). Автоматизированные системы интерпретации образцов флюоресценции способствуют стандартизации и повышению эффективности определения содержания АНА методом НРИФ-HEp-2. Цель - сравнительный анализ автоматизированной и визуальной интерпретации результатов НРИФ-HEp-2 при определении содержания АНА у пациентов с РЗ. Уровень АНА в сыворотках у 1178 больных с РЗ определяли методом НРИФ-HEpA. Результаты НРИФ-HEp-2 оценивали путем визуальной микроскопии и с использованием автоматизированной платформы AKLIDES. Степень согласованности позитивных/негативных результатов обнаружения (к=0,5), типов (к = 0,7) и титров/интенсивности свечения (к=0,45) АНА при автоматизированной и традиционной интерпретации НРИФ-HEp-2 являлась хорошей. Несовпадение позитивных/негативных результатов исследования содержания АНА по данным автоматизированного и визуального методов оценки НРИФ-HEp-2 отметили у 18,5% пациентов. Автоматизированным методом наиболее часто определяли гомогенное (37,6%) и крапчатое (32,3%) свечение ядра; у 21,4°% больных тип свечения не дифференцировался. Визуальным методом в сыворотках у большинства (72,8%) пациентов выявляли смешанный тип свечения. Смешанное свечение распознавалось системой AKLIDES как гомогенное (40,5%), крапчатое (32,7%), нуклеолярное (2,4°%), центромерное (0,9%), недифференцированное (23,5%). При визуальном исследовании образцов флюоресценции с недифференцированным типом свечения у 79,8% больных идентифицировали смешанное свечение, у 5,9% - гомогенное, у 14,3°% - крапчатое. Титры АНА < 1:160 ассоциировались с интенсивностью свечения 0/±; 1:160 - 0, ±, +, ++; 1:320 - +, ++; 1:640 - ++, + ++; > 1:1280 - + ++, + + ++. В рутинной практике автоматизированная система AKLIDES позволяет идентифицировать позитивные/негативные результаты определения содержания АНА сопоставимо с классическим визуальным методом интерпретации НРИФ- HEp-2 и прогнозировать максимальный конечный титр АНА в сыворотках у больных с РЗ по интенсивности флюоресценции. Для подтверждения результатов автоматизированной оценки типов ядерного свечения и уточнения титров АНА рекомендуется дополнительное экспертное визуальное исследование позитивных образцов флюоресценции.