ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ СКРИНИНГОВЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИНУКЛЕАРНЫХ АНТИТЕЛ С ПОМОЩЬЮ НЕПРЯМОЙ РЕАКЦИИ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ НА HEp-2 КЛЕТКАХ И ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА ПРИ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПЕЧЕНИ

Doi: https://doi.org/10.51620/0869-2084-2022-67-11-652-657 ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Антинуклеарные антитела (АНА) - гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с различными компонентами клеточного ядра и цитоплазмы. АНА являются основным серологическим маркером аутоиммунных заболеваний печени (АИЗП). Цель исследования - сравнить диагностическое значение двух методов скринингового определения АНА (непрямой реакции иммунофлюоресценции на клетках HEp-2 (НРИФ-HEp-2) и иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотках больных АИЗП. Исследованы сыворотки 118 больных АИЗП (51 - аутоиммунным гепатитом - АИГ, 19 - первичным билиарным холангитом - ПБХ, 48 - перекрестным синдромом - OVERLAP), 30 больных неалкогольной жировой болезнью печени (НАЖБП) и 30 здоровых доноров (ЗД). Определение АНА методом НРИФ-HEp-2 осуществлялось путем визуальной оценки образцов под микроскопом AXIOSKOP 40, методом ИФА - на автоматическом анализаторе Alegria. Отмечена слабая степень согласованности положительных и отрицательных результатов скринингового исследования АНА при использовании НРИФ-HEp-2 и ИФА (коэффициент каппа Коэна æ=0,4). Скрининговое определение АНА у больных АИЗП методом НРИФ-HEp-2 отличалось большей диагностической чувствительностью (ДЧ) (68,6%) и меньшей частотой выявления ложноотрицательных результатов (31,4%) по сравнению с ИФА (35,6% и 64,4% соответственно, p<0,05). Общая диагностическая специфичность (ДС) исследования АНА в НРИФ-HEp-2 была ниже, чем при применении ИФА (66,7% и 86,7% соответственно, p<0,05). Оба скрининговых метода определения АНА (НРИФ-HEp-2 и ИФА) являлись полезными для диагностирования АИЗП (отношение правдоподобия положительного результата исследования - ОППР: 2,1 и 2,6, соответственно). По уровню отношения правдоподобия отрицательного результата (ОПОР) скрининг АНА методом НРИФ-HEp-2, в отличие от ИФА, служил «полезным» тестом для исключения диагноза АИЗП (0,5 и 0,8 соответственно). Определение АНА с помощью НРИФ-HEp-2 служит наиболее чувствительным и «полезным» скрининговым тестом для диагностики АИЗП, а ИФА относится к категории менее «полезных» скрининговых методов из-за низкой диагностической чувствительности и высокой частоты выявления ложноотрицательных результатов.

Об авторах

Дорофеев Алексей Сергеевич

ГБУЗ МКНЦ имени А.С. Логинова ДЗМ 111123, Москва, Россия мл. науч. сотр. лаб. научно- диагностических исследований a.dorofeev@mknc.ru

Список литературы

Ивашкин В.Т., Буеверов А.О. Аутоиммунные заболевания печени в практике клинициста. М.: М-Вести; 2001

Invernizzi P. Liver auto-immunology: the paradox of autoimmunity in a tolerogenic organ. Journal of Autoimmunity. 2013 Oct; 46: 1-6. https://doi.org/10.1016/j.jaut.2013.08.006

Liberal R., Grant C.R. Cirrhosis and autoimmune liver disease: Current understanding. World J. Hepatol. 2016; 8 (28): 1157-68. https://doi.org/10.4254/wjh.v8.i28.1157

Cristen U., Hintermann E. Autoantibodies in Autoimmune Hepatitis: Can Epitopes Tell Us about the Etiology of the Disease? Front Immunol. 2018 Feb 16; 9: 163. https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.00163

Винницкая Е.В., Сандлер Ю.Г., Бакулин И.Г., Парфенов А.И., Ильченко Л.Ю., Никитин И.Г. и др. Актуальные вопросы диагностики и лечения аутоиммунного гепатита (по материалам Российского консенсуса. 2017 г.). Терапевтический архив. 2018; 90(2): 12-8. https://doi.org/10.26442/terarkh201890212-18

Boberg K.M., Chapman R.W., Hirschfield G.M., Lohse A.W., Manns M.P., Schrumpf E. Overlap syndromes: The International Autoimmune Hepatitis Group (IAIHG) position statement on a controversial issue. Journal of Hepatology. 2011 Feb; 54(2): 374-85. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2010.09.002

Подымова С.Д., Перекрестные аутоиммунные синдромы в гепатологии. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2013; (4): 3-12

Czaja A.J., Autoantibody-Negative Autoimmune Hepatitis. Dig. Dis. Sci. 2012; 57: 610-24. https://doi.org/10.1007/s10620-011-2017-z

Chazouillères O. Overlap Syndromes. Dig Dis. 2015; 33 (suppl. 2): 181-7. https://doi.org/10.1159/000440831

Vergani D., Alvarez F., Bianchi F.B., Cançado E.L., Mackay I.R., Manns M.P. et al.International Autoimmune Hepatitis Group. Liver autoimmune serology: a consensus statement from the committee for autoimmune serology of the International Autoimmune Hepatitis Group. Journal of Hepatology. 2004; 41: 677-83. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2004.08.002

Czaja A.J. Autoantibodies as Prognostic Markers in Autoimmune Liver Disease. Dig. Dis. Sci. 2010; 55: 2144-61. https://doi.org/10.1007/s10620-010-1268-4

Terziroli Beretta-Piccoli B., Mieli-Vergani G., Vergani D. Serology in autoimmune hepatitis: A clinical-practice approach. European Journal of Internal Medicine 48 (2018) 35-43. https://doi.org/10.1016/j.ejim.2017.10.006

Agmon-Levin N., Damoiseaux J., Kallenberg C., Sack U., Witte T., Herold M. et al.International recommendations for the assessment of autoantibodies to cellular antigens referred to as anti-nuclear antibodies. Ann. Rheum. Dis. 2014; 73 (1): 17-23. https://doi.org/10.1136/annrheumdis-2013-203863

Galaski J., Weiler-Normann C., Schakat M., Zachou K., Muratori P., Lampalzer S. et al. Update of the simplified criteria for autoimmune hepatitis: evaluation of the methodology for immunoserological testing. Journal Pre-proof. 2020. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2020.07.032

Mack C.L., Adams D., Assis D.N., Kerkar N., Manns M.P., Mayo M.J. et al. Diagnosis and Management of Autoimmune Hepatitis in Adults and Children: 2019 Practice Guidance and Guidelines from the American Association for the Study of Liver Diseases. Hepatology. 2020 Aug; 72(2): 671-722. https://doi.org/10.1002/hep.31065

European Association for the Study of the Liver. EASL Clinical Practice Guidelines: Autoimmune hepatitis. J. Hepatol. 2015; 63: 971-1004. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2015.09.016

Hennes E.M., Zeniya M., Czaja A.J., Parés A., Dalekos G.N., Krawitt E.L. et al. Simplified criteria for the diagnosis of autoimmune hepatitis. American Association for the Study of Liver Diseases. Hepatology. 2008 Jul; 48(1): 169-76. https://doi.org/10.1002/hep.22322

Lindor K.D., Gershwin M.E., Poupon R., Kaplan M., Bergasa N.V., Heathcote E. et al. Primary biliary cirrhosis. American Association for the Study of Liver Diseases. Hepatology. 2009 Jul; 50(1): 291-308. https://doi.org/10.1002/hep.22906

Alvarez F., Berg P.A., Bianchi F.B., Bianchi L., Burroughs A.K., Cancado E.L et al.International Autoimmune Hepatitis Group Report: review of criteria for diagnosis of autoimmune hepatitis. Journal of Hepatology. 1999 Nov; 31(5): 929-38. https://doi.org/10.1016/s0168-8278(99)80297-9

Bogdanos D.P, Invernizzi P., Mackay I.R, Vergani D. Autoimmune liver serology: current diagnostic and clinical challenges. World J. Gastroenterol. 2008 Jun 7; 14(21): 3374-87. https://doi.org/10.3748/wjg.14.3374

Lindor K.D, Bowlus C.L., Boyer J., Levy C., Mayo M. Primary Biliary Cholangitis: 2018 Practice Guidance from the American Association for the Study of Liver Diseases. Hepatology. 2019 Jan; 69(1): 394-419. https://doi.org/10.1002/hep.30145

Zhang W., De D., Mohammed K.A., Munigala S., Chen G., Lai J.P. et al. New Scoring Classification for Primary Biliary Cholangitis-Autoimmune Hepatitis Overlap Syndrome. Hepatology Communications, 2018 Feb 20; 2(3): 245-253. https://doi.org/10.1002/hep4.1148

Czaja A.J. Performance Parameters of the Conventional Serological Markers for Autoimmune Hepatitis. Dig. Dis. Sci. 2011 Feb; 56(2): 545-54. https://doi.org/10.1007/s10620-010-1501-1

Chan E.K.L., von Mühlen C.A., Fritzler M.J., Damoiseaux J., Infantino M., Klotz W. et al. ICAP Committee. The International Consensus on ANA Patterns (ICAP) in 2021-The 6th Workshop and Current Perspectives. J. Appl. Lab. Med. 2022; 7(1): 322-30. https://doi.org/10.1093/jalm/jfab140

Meroni P.L., Schur P.H. ANA screening: an old test with new recommendations. Ann. Rheum. Dis. 2010; 69 (8): 1420-2. https://doi.org/10.1136/ard.2009

Cotler S.J., Kanji K., Keshavarzian A., Jensen D.M., Jakate S. Prevalence and significance of autoantibodies in patients with non-alcoholic steatohepatitis. J. Clin. Gastroenterol. 2004 Oct; 38 (9): 801-4. https://doi.org/10.1097/01.mcg.0000139072.38580.a0

Tsuneyama K., Baba H., Kikuchi K., Nishida T., Nomoto K., Hayashi S. et al. Autoimmune features in metabolic liver disease: a single-center experience and review of the literature. Clin. Rev. Allergy Immunol. 2013 Aug; 45 (1): 143-8. https://doi.org/10.1007/s12016-013-8383-x

Loria P., Lonardo A., Leonardi F., Fontana C. Carulli L, Verrone A.M. et al. Non-organ-specific autoantibodies in nonalcoholic fatty liver disease: prevalence and correlates. Dig. Dis. Sci. 2003 Nov; 48 (11): 2173-81. https://doi.org/10.1023/b:ddas.0000004522.36120.08

Mitra A, Ray S. High-Titre ANA Positivity in NAFLD: An Uncommon Presentation of a Common Disease. Eur. J. Case Rep.Intern. Med. 2020 Jun 8; 7(9): 001714. https://doi.org/10.12890/2020_001714

Adams L.A., Lindor K.D., Angulo P. The prevalence of autoantibodies and autoimmune hepatitis in patients with nonalcoholic Fatty liver disease. Am. J. Gastroenterol. 2004 Jul; 99(7): 1316-20. https://doi.org/10.1111/j.1572-0241.2004.30444.x

Ключевые слова

#антинуклеарные антитела #аутоиммунные заболевания печени #диагностическое значение #иммуноферментный анализ #непрямая реакция иммунофлюоресценции на HEp-2 клетках

Для цитирования: Дорофеев А.С., Александрова Е.Н., Новиков А.А., Салиев К.Г., Сандлер Ю.Г., Винницкая Е.В. Диагностическое значение скрининговых методов определения антинуклеарных антител с помощью непрямой реакции иммунофлюоресценции на HEp-2 клетках и иммуноферментного анализа при аутоиммунных заболеваниях печени. Клиническая лабораторная диагностика. 2022; 67(11): 652-657. https://doi.org/10.51620/0869-2084-2022-67-11-652-657

For citation: Dorofeev A.S., Aleksandrova E.N., Novikov A.A., Saliev K.G., Sandler Yu.G., Vinnitskaya E.V. Diagnostic value of screening methods for the determination of antinuclear antibodies using indirect immunofluorescence on HEp-2 cells and enzyme immunoassay in autoimmune liver diseases. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics). 2022; 67(11): 652-657 (in Russ.). https://doi.org/10.51620/0869-2084-2022-67-11-652-657