ДНК-диагностика синегнойной инфекции

Аннотация

Современная лабораторная диагностика синегнойной инфекции, включающая бактериологическое исследование с последующей идентификацией возбудителя, трудоемка и не всегда результативна в связи с изменчивостью его диагностических признаков. В настоящей работе представлен лабораторный способ идентификации Pseudomonas aeruginosa, основанный на электрофоретическом анализе ДНК, выделяемой из раневого материала или микробной массы, выращенной на плотной питательной среде. Материал из раны или чистую культуру помещают в физиологический раствор и прогревают при 99°С, что приводит к выделению в супернатант ДНК, образец которой подвергается стандартному горизонтальному электрофорезу в агарозном геле с бромистым этидием. Присутствие на электрофореграммах трех полос ДНК, флюоресцирующих в ультрафиолете, с размером фрагментов около 10 000, 6000 - 8000 и менее 750 пар нуклеотидов свидетельствует о наличии в исследуемом биоматериале P. aeruginosa. Данный способ позволяет идентифицировать как пигментобразующие, так и беспигментные штаммы P. aeruginosa, и дифференцировать их от других представителей неферментирующих грамотрицательных бактерий и наиболее значимых родов и видов семейства Enterobacteriaceae. Идентификация P. aeruginosa в раневом материале предлагаемым способом, осуществляемая без его бактериологического исследования, может служить методом экспресс-диагностики синегнойной инфекции.