МУЛЬТИПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ НАРКОТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ ТЕХНОЛОГИИ ИММУНОЧИПОВ ФОСФАН

ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Посмотреть или загрузить статью

Читать

Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Разработан новый метод мультиплексного количественного анализа наркотических, психотропных средств на основе технологии Фосфан с использованием иммуночипов в формате стандартных 96-луночных планшетов, моноклональных антител к наркотическим соединениям и Pt-копропорфирина в качестве длительно люминесцирующего метчика. Для мультиплексного анализа используется 20 мкл биологической жидкости человека (мочи, сыворотки крови или слюны) или 2 диска диаметром 3,2 мм из высушенного на бумаге пятна мочи. Не требуется предварительная обработка или разведение исследуемой пробы. Продемонстрирован широкий диапазон измеряемых концентраций при высокой чувствительности анализа: 1 нг/мл морфина и метадона, 0,5 нг/мл барбитуратов, 2 нг/мл бензоилэкгонина, метамфетамина, каннабиноидов и бензодиазепинов, 8 нг/мл амфетамина при вариабельности результатов не более 15%. Апробация метода на аттестованных образцах мочи (n = 197) и сывороток крови (n = 98) показала, что метод позволяет правильно определять опиаты, кокаин, каннабиноиды, метадон, бензодиазепины, барбитураты и амфетамины при отсутствии ложноположительных результатов при исследовании образцов, содержащих ненаркотические лекарственные средства. Результаты исследования высушенных на бумаге проб мочи (n = 50) хорошо совпадали с результатами анализа жидких проб для всех исследуемых аналитов. На основе предложенного мультиплексного анализа разработана тест-система Нарк-Фосфан для количественного исследования одновременно до 96 проб различных биологических жидкостей, в том числе в виде высушенных на бумаге пятен. Продемонстрированные высокая чувствительность, специфичность и точность анализа при определении наиболее распространённых наркотических средств позволяют предложить его в качестве первичного теста при массовых обследованиях населения для выявления наркомании, особенно на ранней стадии.

Об авторах

Бекман Наталья Игоревна

ФГУП «ГосНИИ биологического приборостроения» ФМБА РФ г. Москва Лаборатория молекулярных методов диагностики инфекционных и соматических заболеваний nibeckman@mail.ru

Список литературы

Raikas N., Christopoulou K., Theodoridis G., Tsoukali H., Psaroulis D. Determination of amphetamines in human urine by headspace solid-phase microextraction and gas chromatography. J. Chromatogr. B. 2003; 789: 59-63.

Sun Q.R., Xiang P., Yan H., Shen M. Simultaneous analyses of cocaine and its metabolite benzoylecgonine in urine by LC-HPLC. J. Forensic Sci. 2008; 24: 268-72.

Nakashima R. Development of ultra sensitive HPLC determination for drugs of abuce. Chromatography. 2009; 30: 57-60.

Wohlfarth A., Scheidweiler K.B., Chen X., Liu H., Huestis M.A. Qualitative confirmation of 9 synthetic cannabinoids and 20 metabolites in human urine using LC-MS/MS and library search. Anal. Chem. 2013; 85: 3730-8.

Шанин И.А., Хан О.Ю., Петухов А.Е., Смирнов А.В., Еремин С.А. Детектирование амфетаминов в моче с помощью иммунохроматографических тест-полосок. Судебно-медицинская экспертиза. 2012; 55(4): 33-7

Crooks C.R., Brown S. Roche DAT immunoassay: sensitivity and specificity testing for amphetamines, cocaine, and opiates in oral fluid. J. of Analytical Toxicology. 2010; 34: 103-9.

Snyder M.L., Jarolim P., Melanson S.E. A new automated urine 8. fentanyl immunoassay: technical performance and clinical utility for monitoring fentanyl compliance. Clin Chim Acta. 2011; 412(11-12): 946-51.

Carney S., Wolf C.E., Tarnai-Moak L., Poklis A. Evaluation of two enzyme immunoassays for the detection of the cocaine metabolite benzoylecgonine in 1,398 urine specimens. J. Clin. Lab. Anal. 2012; 26(3): 130-5.

Gandhi S., Sharma P., Capalash N., Verma R.S., Suri R.C. Group-selective antibodies based fluorescence immunoassay for monitoring opiate drugs. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2008; 392 (1-2): 215-22.

Bruls D.M., Evers T.H., Kahlman J.A., van Lankvelt P.J., Ovsyanko M., Pelssers E.G. Rapid integrated biosensor for multiplexed immunoassays based on actuated magnetic nanoparticles. Lab. Chip. 2009; 9(24): 3504-10.

Smith J., Sammons D., Robertson S., Biagini R., Snawder J. Measurement of multiple drugs in urine, water, and on surfaces using fluorescence covalent microbead immunosorbent assay. Toxicol. Mech. Methods. 2010;20(9): 587-93.

Ellefsen K.N., Anizan S., Castaneto M.S., Desrosiers N.A., Martin T.M., Klette K.L. Validation of the only commercially available immunoassay for synthetic cathinones in urine: Randox Drugs of Abuse V Biochip Array Technology. Drug Test Anal. 2014; 6(0): 728-38.

Помелова В.Г., Осин Н.С. Перспективы интеграции технологии сухого пятна крови в популяционные исследования здоровья и среды обитания человека. Вестник РАМН. 2007; 12:10-6

Stove C.P., Ingels A.S., De Kesel P.M., Lambert W.E. Dried blood spots in toxicology: from the cradle to the grave? Crit Rev Toxicol. 2012; 42(3):230-43

Осин Н.С., Помелова В.Г., Быченкова Т.А., Соколов А.С. Способ многоаналитного иммуноанализа. Патент РФ № 2184970; 2002.

Осин Н.С., Помелова В.Г., Соколов А.С., Быченкова Т.А., Бекман Н.И. Шарафудинова Т.Ю. и др. Фосфоресцентный микроанализ как новая технологическая платформа для молекулярной диагностики. Вестник РАМН. 2007; 12: 3-10.

Бекман Н.И., Ларичева С.Ю., Быченкова Т.А., Помелова В.Г., Осин Н.С. Применение технологии иммуночипов ФОСФАН для исследования маркеров щитовидной железы. Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 5: 23-6.

Бекман Н.И., Быченкова Т.А., Ларичева С.Ю., Помелова В.Г. и др. Способ одновременного детектирования тиротропина и общего тироксина в сухих пятнах крови. Патент РФ № 2480772; 2013.

Осин Н.С., Бекман Н.И., Помелова В.Г., Гранцева Н.Х. Способ многоаналитного иммуноанализа. Патент РФ № 2593787; 2016.

Ключевые слова

#амфетамины #барбитураты #бензодиазепины #биочипы #каннабиноиды #кокаин #морфин #мультиплексный анализ #наркотики #Фосфан