Научно-практический журнал Клиническая лабораторная диагностика

Оптимальные условия хранения сперматозоидов для анализа фрагментации ДНК

Татару Дарья Анатольевна

ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Посмотреть или загрузить статью

Скачать
Читать
Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Исследование уровня фрагментации ДНК сперматозоидов методом проточной цитометрии для оценки мужской фертильности все чаще начинает применяться в клинической диагностике, однако создание оптимального протокола хранения и подготовки сперматозоидов для анализа до сих пор находится на стадии экспериментальной разработки. Цель исследования - изучить влияние различных условий подготовки эякулята для адекватной оценки индекса фрагментации ДНК (ИФД) сперматозоидов методом SCSA (sperm chromatin structure assay). У 20 пациентов Красноярского центра репродуктивной медицины оценивали ИФД методом SCSA в свежем нативном эякуляте и после хранения сперматозоидов при различной температуре (37, 25, 4 С) и длительности (1-2 и 1-3 сут) и условий хранения (при -20 или -70 С) замороженных сперматозоидов (в виде нативного эякулята или в TNE-буфере), Показано, что ИФД существенно не меняется в эякуляте, хранившемся при 4 С в течение 48 ч. При хранении эякулята при (25 или 37 С ИФД значительно увеличивается уже после 1-х суток, а инкубация эякулята при 37 С приводит к повышению ИФД уже после 1-го часа. Выявлены индивидуальные различия по степени увеличения ИФД под воздействием изучаемых температур инкубации эякулята. Хранение сперматозоидов при температуре 20 или 70 С в нативном эякуляте либо в TNE-буфере не влияло на ИФД при измерении в течении 1-2 ч. Таким образом, хранение и транспортировка нативного эякулята при 4 С в течение от 1 до 2 сут или в замороженном виде при температуре -20 или -70 С могут быть рекомендованы для адекватной оценки уровня фрагментации ДНК сперматозоидов.