Аннотация
Одна из распространённых генетических причин идиопатического мужского бесплодия связана с микроделециями в локусе AZF, расположенном в Y-хромосоме. Частота таких микроделеций в общей популяции составляет 1:4000, однако у инфертильных мужчин их частота варьирует от 2 до 10%. В локусе AZF различают три субрегиона: AZFa, AZFb и AZFc. Потеря одного или нескольких субрегионов может приводить к различной степени нарушения сперматогенеза — от снижения его активности до Сертоли-клеточного синдрома, выраженного азооспермией или олигоспермией тяжёлой степени. Поэтому проведение генетического тестирования на наличие микроделеций в локусе AZF является необходимым тестом при прогнозировании мужского бесплодия и его лечения. Цель настоящего исследования — разработать и апробировать диагностическую систему для выявления микроделеций в субрегионах локуса AZF с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. В качестве референсного метода использовали методику, описанную в рекомендациях, выпущенных Европейской академией андрологии (EuropeanAcademyofAndrology, EAA) совместно с Европейской сетью качества молекулярно-генетичеких исследований (EuropeanMolecularGeneticsQualityNetwork, EMQN) (Krauz C. и соавт., 2014). При апробации методики было проанализировано 33 образца ДНК, выделенных из крови мужчин с азооспермией и олигоспермией тяжёлой степени. В сравнении с референсной методикой дискордантных результатов получено не было. В 27 образцах ДНК выявлены делеции в локусе AZF: 4 делеции AZFa (15%), 2 делеции AZFb (7%), 17 делеций AZFc (63%) и 6 сочетанных делеций AZFb+c и AZFa+b+с (22%). Предлагаемая методика позволяет выявлять микроделеции субрегионов локуса AZF.
Список литературы
Katherine L., O’Brien K.L., Varghese A.C., Agarwal A. The genetic causes of male factor infertility: A review. Fertil. Steril.2010; 93(1): 1-12.
Stouffs K., Seneca S., Lissens W. Genetic causes of male infertility. Ann. Endocrinol. (Paris). 2014; 75(2): 109-11. Massart A., Lissens W., Tournaye H., Stouffs K. Genetic causes of spermatogenic failure.Asian J. Androl. 2012; 14(1): 40-8.
Ghorbel M., Gargouri Baklouti S., Ben Abdallah F., Zribi N., Cherif M., Keskes R. et al. Chromosomal defects in infertile men with poor semen quality. J. Assist. Reprod. Genet. 2012; 29(5): 451-56.
Foresta C., Moro E., Ferlin A. Y сhromosome microdeletions and alterations of spermatogenesis. Endocr. Rev. 2001; 22 (2): 226-39.
Liu X.G., Hu H.Y., Guo Y.H., Sun Y.P. Correlation between Y chromosome microdeletion and male infertility. Genet. Mol. Res. 2016; 15 (2).
Tiepolo L., Zuffardi O. Localization of factors controlling spermatogenesis in the nonfluorescent portion of the human Y chromosome. Hum.Genet. 1976; 34(2): 119-24.
Navarro-Costa P., Plancha C.E., Goncalves J. Genetic dissection of the AZF regions of the human Y chromosome: thriller or filler for male (in)fertility. J. Biomed. Biotechnol. 2010; 936569.
Yu X.W.,Wei Z.T., Jiang Y.T., Zhang S.L. Y chromosome azoospermia factor region microdeletions and transmission characteristics in azoospermic and severe oligozoospermic patients. Int. J. Clin. Exp. Med. 2015; 8(9): 14634-46.
Chernykh V.B. AZF deletions — a frequent genetic cause of infertility in men: the current state of research. Problemy reproduktsii. 2009; (1): 10-5. (in Russian)
Черных В.Б. AZF делеции — частая генетическая причина бесплодия у мужчин: современное состояние исследований. Проблемы репродукции. 2009; (1): 10-5.
Черных В. Б. Аномалии половых хромосом при нарушениях формирования пола и репродукции человека: Дисс…. д-ра мед.наук. М.; 2015.
Тулеева Л.Н., Аралбаева А.Н. Роль делеций гена AZFc в развитии мужского бесплодия. Андрология. 2015; (7): 42-5.
Барков И.Ю., Сорока Н.Е., Попова А.Ю., Гамидов С.И., Беляева Н.А., Глинкина Ж.И. и др. Диагностика мужского бесплодия, ассоциированного с микроделециями в локусе AZF хромосомы Y. Акушерство и гинекология. 2014; (1): 59-64.
Черных В.Б., Курило Л.Ф., Шилейко Л.В., Ширшова Л.С., Чухрова А.Л., Ковалевская Т.С., и др. Анализ микроделеций в локусе AZF у мужчин с бесплодием: совместный опят исследования. Медицинская генетика. 2003; (8): 367-79.
Беляева Н.А., Глинкина Ж.И., Калинина Е.А. Современные аспекты проблемы мужского бесплодия, ассоциированного с мутацией AZF локуса хромосомы Y. Акушерство и гинекология.2012; 8(2): 21-7.
Suganthi R., Vijesh V., Jayachandran S., Fathima Benazir J.A. Multiplex PCR based screening for microdeletions in azoospermia factor region of Y chromosome in azoospermic and severe oligozoospermic south Indian men. Iran. J. Reprod. Med. 2013;11(3):219-26.
Wettasinghe T.K., Jayasekara R.W., Dissanayake V.H. Y chromosome microdeletions are not associated with spontaneous recurrent pregnancy loss in a Sinhalese population in Sri Lanka. Hum. Reprod. 2010; 25(12): 3152-6.
Shimizu A., Ichikawa T., Suzuki N., Yamazaki T., Imamoto T., Kojima S. et al. Microdeletions in the Y chromosome of patients with idiopathic azoospermia. Asian. J. Androl. 2002; 4(2): 111-5.
Zaimy M.A., Kalantar S.M., Sheikhha M.H., Jahaninejad T., Pashaiefar H., Ghasemzadeh J. et al. The frequency of Yq microdeletion in azoospermic and oligospermic Iranian infertile men. Iran. J. Reprod. Med. 2013; 11(6): 453-8.
Peng D., Zhang Y.S., Zhang X.Y., Hu C., Liu M.H., Liu R.Z. An infertile 45, X male with a SRY-bearing chromosome 13: a clinical case report and literature review. J. Assist. Reprod. Genet. 2015; 32(1): 107-9.
Renwick P.J., Trussler J., Ostad-Saffari E., Fassihi H., Black C., Braude P. et al. Proof of principle and first cases using preimplantation genetic haplotyping-a paradigm shift for embryo diagnosis. Reprod. Biomed. Online. 2006; 13(1): 110-9.
Poongothai J., Gopenath T.S., Manonayaki S. Genetics of human male infertility. Singapore Med. J. 2009; 50(4): 336-47.
Navarro-Costa P., Gonçalves J., Plancha C.E. The AZFc region of the Y chromosome: at the crossroads between genetic diversity and male infertility. Hum. Reprod. Update. 2010; 16(5): 525-42.
Yu X.W., Wei Z.T., Jiang Y.T., Zhang S.L.Y chromosome azoospermia factor region microdeletions and transmission characteristics in azoospermic and severe oligozoospermic patients. Int. J. Clin. Exp. Med. 2015; 8(9): 14634-46.
Hopps C.V., Mielnik A., Goldstein M., Palermo G.D., Rosenwaks Z., Schlegel P.N. Detection of sperm in men with Y chromosome microdeletions of the AZFa, AZFb and AZFc regions. Hum. Reprod. 2003; 18(8): 1660-5.