Научно-практический журнал Клиническая лабораторная диагностика

РАЗРАБОТКА И АПРОБАЦИЯ МЕТОДИКИ НА ОСНОВЕ МУЛЬТИПЛЕКСНОЙ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛИНИЧЕСКИ ЗНАЧИМЫХ МИКРОДЕЛЕЦИЙ В Y-ХРОМОСОМЕ

ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Посмотреть или загрузить статью

Скачать
Читать
Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Одна из распространённых генетических причин идиопатического мужского бесплодия связана с микроделециями в локусе AZF, расположенном в Y-хромосоме. Частота таких микроделеций в общей популяции составляет 1:4000, однако у инфертильных мужчин их частота варьирует от 2 до 10%. В локусе AZF различают три субрегиона: AZFa, AZFb и AZFc. Потеря одного или нескольких субрегионов может приводить к различной степени нарушения сперматогенеза - от снижения его активности до Сертоли-клеточного синдрома, выраженного азооспермией или олигоспермией тяжёлой степени. Поэтому проведение генетического тестирования на наличие микроделеций в локусе AZF является необходимым тестом при прогнозировании мужского бесплодия и его лечения. Цель настоящего исследования - разработать и апробировать диагностическую систему для выявления микроделеций в субрегионах локуса AZF с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. В качестве референсного метода использовали методику, описанную в рекомендациях, выпущенных Европейской академией андрологии (EuropeanAcademyofAndrology, EAA) совместно с Европейской сетью качества молекулярно-генетичеких исследований (EuropeanMolecularGeneticsQualityNetwork, EMQN) (Krauz C. и соавт., 2014). При апробации методики было проанализировано 33 образца ДНК, выделенных из крови мужчин с азооспермией и олигоспермией тяжёлой степени. В сравнении с референсной методикой дискордантных результатов получено не было. В 27 образцах ДНК выявлены делеции в локусе AZF: 4 делеции AZFa (15%), 2 делеции AZFb (7%), 17 делеций AZFc (63%) и 6 сочетанных делеций AZFb+c и AZFa+b+с (22%). Предлагаемая методика позволяет выявлять микроделеции субрегионов локуса AZF.