Научно-практический журнал Клиническая лабораторная диагностика

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДОВ ДЕТЕКЦИИ МИКРОРНК С ПОМОЩЬЮ МЕТОДА ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ И КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ОТ-ПЦР)

ISSN: 0869-2084 (Print) ISSN: 2412-1320 (Online)

Посмотреть или загрузить статью

Скачать
Читать
Аннотация Об авторах Список литературы Ключ. слова

Аннотация

Многие патологические состояния сопровождаются характерными изменениями профиля в клетках микроРНК - малых молекул, которые регулируют экспрессию генов на посттранскрипционном уровне. Это даёт возможность рассматривать микроРНК как перспективный класс биологических маркёров. Осуществлено прямое сравнение трёх методов проведения ОТ-ПЦР (s-Loop, u-Elong и 2-Tail) для анализа микроРНК с применением синтетического аналога микроРНК-451 для определения эффективности детекции молекул микроРНК и проведён анализ профиля миРНК-29b, миРНК-375 и миРНК-451 в стабильных клеточных линиях OAW42 и HT29. Методами 2-Tail и s-Loop также был проведён анализ семи разых микроРНК в 13 клинических образцах. Результаты показывают, что в подходах 2-Tail и s-Loop проведение ОТ-ПЦР демонстрирует высокую воспроизводимость результатов анализа микроРНК и линейную зависимость эффективности детекции синтетической микроРНК-451 в диапазоне 107-103 молекул на реакцию. По ряду значимых критериев две технологии оказались относительно равноценными, т.е. обе могут быть использованы в качестве основы для метода клинической диагностики.