Тест-система для определения микроальбуминурии с использованием нового рекомбинантного альбуминсвязывающего полипептида

Аннотация

Наиболее значимыми патологиями, обусловливающими нарушение экскреции белка с мочой, являются СД и АГ — именно эти заболевания наиболее опасны для почек. Поэтому важное значение имеет поиск ранних признаков поражения почек у больных этими заболеваниями. Одним из ранних признаков поражения почек у больных СД и АГ является микроальбуминурия. Только эта ранняя (доклиническая) стадия поражения почек является единственной обратимой при своевременном назначении медикаментозной терапии. Практически все применяемые в настоящее время диагностические тест-системы для выявления микроальбуминурии основаны на иммунологическом полуколичественном и количественном определении концентрации ЧСА в моче. В настоящей работе использован новый рекомбинантный ЧСА-связывающий полипептид А3 из штамма стрептококка группы G, выделенного из коровьего молока. Изучена ЧСА-связывающая способность полипептида А3 в сравнении с таковой у полипептида А2. Рекомбинантный ЧСА-связывающий полипептид А2 ранее был впервые применен в тест-системе для выявления микроальбуминурии вместо обычно используемых антител. Изучение ЧСА-связывающей способности рекомбинантных полипептидов А3 и А2 показало, что оба они способны вступать во взаимодействие с ЧСА как в растворе, так и в адсорбированном состоянии. Это свойство позволило использовать полипептид А3 в иммобилизованном виде в количественной тест-системе для определения микроальбуминурии. В настоящей работе также предлагается специфический и чувствительный метод скрининга и мониторинга больных СД и АГ, в котором был использован меченый ЧСА-связывающий полипептид А3 в сочетании с технологией микрочипа. В результате сравнения тест-систем с использованием рекомбинантных полипептидов А2 и А3 было выявлено, что использование в тест-системе полипептида А3 позволяет более точно определить концентрацию ЧСА в пробах мочи. Такая тест-система успешно применена как для выявления, так и для количественного определения микроальбуминурии у больных СД и АГ.

Об авторах

Список литературы

Weir M.R. Microalbuminuria and cardiovascular disease. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2007; 2(3): 581-90.

Ларичева Е.С., Мнускина М.М, Козлов А.В., Зайчик А.М. Определение концентрации альбумина в моче с помощью гетерогенного твердофазового конкурентного рецепторного анализа. Эфферентная терапия. 2007; 13(4): 27-31.

Хаишева Л.А., Кательницкая Л.И. Микроальбуминурия как фактор прогноза сердечно-сосудистых осложнений и маркер эффективности терапии у пациентов с артериальной гипертонией. Рациональная фармакотерапия в кардиологии. 2008; 4(1): 51-5.

De Zeeuw D., Parving H.H., Henning R.H. Microalbuminuria as an early marker for cardiovascular disease. J. Am. Soc. Nephrol. 2006; 17(8): 2100-5.

Comper W.D., Osicka T.M., Clark M., MacIsaac R.J., Jerums G. Earlier detection of microalbuminuria in diabetic patients using a new urinary albumin assay. Kidney Int. 2006; 65(5); 1850-5.

Myhre E.B., Kronvall G. Demonstration of specific binding sites for human serum albumin in group C and G streptococci. Infect. Immun. 1980; 27(1): 6-14.

Widebäck K., Havlícek J., Kronvall G. Demonstration of a receptor for mouse and human serum albumin in Streptococcus pyogenes. Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. B. 1983; 91(6): 373-82.

Johansson M.U., de Chateau M., Bjorck L., Forsen S., Drakenberg T., Wikstrom M. The GA module, a mobile albumin-binding bacterial domain, adopts a three-helix-bundle structure. FEBS Lett. 1995; 374(2): 257-61.

Johansson M.U., Nilsson H., Evenas J., Forsen S., Bjork L., Wikstrom M. Differences in backbone dynamics of two homologous bacterial albumin-binding modules: implications for binding specifity and bacterial adaptation. J. Mol. Biol. 2002; 316(5): 1083-99.

Ключевые слова