Тест-система для определения микроальбуминурии с использованием нового рекомбинантного альбуминсвязывающего полипептида

Аннотация

Наиболее значимыми патологиями, обусловливающими нарушение экскреции белка с мочой, являются СД и АГ - именно эти заболевания наиболее опасны для почек. Поэтому важное значение имеет поиск ранних признаков поражения почек у больных этими заболеваниями. Одним из ранних признаков поражения почек у больных СД и АГ является микроальбуминурия. Только эта ранняя (доклиническая) стадия поражения почек является единственной обратимой при своевременном назначении медикаментозной терапии. Практически все применяемые в настоящее время диагностические тест-системы для выявления микроальбуминурии основаны на иммунологическом полуколичественном и количественном определении концентрации ЧСА в моче. В настоящей работе использован новый рекомбинантный ЧСА-связывающий полипептид А3 из штамма стрептококка группы G, выделенного из коровьего молока. Изучена ЧСА-связывающая способность полипептида А3 в сравнении с таковой у полипептида А2. Рекомбинантный ЧСА-связывающий полипептид А2 ранее был впервые применен в тест-системе для выявления микроальбуминурии вместо обычно используемых антител. Изучение ЧСА-связывающей способности рекомбинантных полипептидов А3 и А2 показало, что оба они способны вступать во взаимодействие с ЧСА как в растворе, так и в адсорбированном состоянии. Это свойство позволило использовать полипептид А3 в иммобилизованном виде в количественной тест-системе для определения микроальбуминурии. В настоящей работе также предлагается специфический и чувствительный метод скрининга и мониторинга больных СД и АГ, в котором был использован меченый ЧСА-связывающий полипептид А3 в сочетании с технологией микрочипа. В результате сравнения тест-систем с использованием рекомбинантных полипептидов А2 и А3 было выявлено, что использование в тест-системе полипептида А3 позволяет более точно определить концентрацию ЧСА в пробах мочи. Такая тест-система успешно применена как для выявления, так и для количественного определения микроальбуминурии у больных СД и АГ.